Иммуномодулирующая профилактика и пути повышения резистентности сельскохозяйственных животных

Министерство образования и науки Российской Федерации

Московский государственный университет прикладной биотехнологии

Кафедра микробиологии и иммунологии

Курсовая работа

Выполнил: студент 2 курса 9 группы

Егоров П.А.

Научный руководитель:

проф. Скородумов Д.И.

Москва

2005

Содержание

I. Введение

II. Иммуномодулирующая профилактика

1. Роль условно-патогенных бактерий и вирусов в этиопатогенезе острых кишечных и респираторных болезней

2. Применение Т - и В-активина при острых кишечных и респираторных заболеваниях животных

3. Использование для профилактики и лечения острых кишечных заболеваний специфических поливалентных вакцин и сывороток крови

3. Использование для профилактики и лечения острых кишечных заболеваний лактобактерина и бактериофагов

III. Пути повышения резистентности сельскохозяйственных животных

1. Генетические факторы повышения резистентности

2. Использование фенотипических факторов

3. Иммуномодулирующая профилактика и терапия

Заключение

Список литературы

I. Введение

В настоящее время общепринятым является представление о том, что в организме человека и животных существует единая нейроэндокринно-иммунная система регуляции, которая выполняет всеобъемлющую функцию по координации деятельности всех органов и систем как единого целого, обеспечивая адаптацию организма к постоянно меняющимся факторам внешней и внутренней среды. Результатом этого является сохранение гомеостаза, который необходим для поддержания нормальной жизнедеятельности организма и его резистентности.

Под резистентностью понимают устойчивость организма к действию физических, химических и биологических агентов, способных вызвать патологическое состояние. Термины "резистентность" и "иммунитет" идентичны (невосприимчивость, устойчивость к чему-либо). Но под иммунитетом чаще понимают устойчивость живых организмов к воздействию биологических факторов как способ защиты внутреннего постоянства организма от живых тел и веществ, несущих в себе признаки генетически чужеродной информации (Р.В. Петров, 1976).

В процессе эволюции в живых организмах возникли три основные системы резистентности: конституциональная, фагоцитарная и лимфоидная. Конституциональная система резистентности (клеточная мембрана, эпителиальные и эндотелиальные покровы, фитонциды, лизоцим, интерферон, комплемент и др.), являясь самой древней по происхождению, включает в себя механические и химические факторы защиты. Она присуща всем живым организмам - от одноклеточных до позвоночных. Конституциональные факторы резистентности возникли в результате мутаций и наследственного закрепления молекулярного устройства организма, препятствующего взаимодействию с неблагоприятными для организма экологическими, физиологическими и химическими агентами.

Растениям, бактериям, вирусам, простейшим, грибам присуща только конституциональная система резистентности. У беспозвоночных и позвоночных организмов в дополнение к конституциональной появилась фагоцитарная защита - фагоцитоз чужеродных агентов с участием нейтрофилов и макрофагов.

Конституциональные факторы и фагоцитирующие клетки принято называть неспецифическими факторами защиты, факторами естественной резистентности, или факторами неспецифического иммунитета.

Неспецифические факторы защиты действуют практически всегда и с одинаковой силой против всех чужеродных агентов микробной и немикробной природы и передаются по наследству, так как они обусловлены врожденными биологическими особенностями. Присущими данному виду живых организмов.

У позвоночных животных неспецифическая система резистентности дополнена мощной лимфоидной специфической (специфическим иммунитетом), достигшей наибольшего развития у теплокровных животных, внутренняя среда которых благоприятна не только для собственных клеток. Наличие всех питательных веществ и постоянная температура тела создали благоприятные условия для жизнедеятельности практически непредсказуемого количества чужеродных организмов, что, вероятно, и послужило причиной возникновения у высших животных дополнительной, наиболее совершенной, специальной защиты ко всему генетически чужеродному, проникающему в организм.

Специфическая система иммунитета имеет свои центральные и периферические органы, в которых происходят образование, дифференцировка и созревание иммунных лимфоцитов - основных факторов специфического иммунитета. Каждый клон иммунных лимфоцитов специфически действует лишь против определенного антигена. Лимфоциты по кровеносным и лимфатическим сосудам, межтканевым щелям проникают в самые отдаленные участки тела, распознают и уничтожают чужеродные в генетическом отношении вещества, в том числе и микробной природы, нередко погибая при этом. Специфический иммунитет является приобретенным и не передается по наследству.

Иммунология в настоящее время переживает период бурного развития, привлекая своими успехами внимание ученых и практических работников самых разных профессий и специальностей. Интерес к этой науке вызван многими новыми открытиями и важными результатами, благодаря которым изменились представления о сущности и механизмах иммунитета, о роли иммунной системы в организме, о возможности через иммунную систему влиять на течения разнообразных инфекционных и неинфекционных патологических процессов. Иммунология, развивавшаяся в течение многих десятилетий как наука о невосприимчивости к инфекционным агентам, трансформировалась в науку о сохранении биологической индивидуальности, чему способствовали успехи молекулярной биологии, цитологии, биохимии, генетики.

II. Иммуномодулирующая профилактика

1. Роль условно-патогенных бактерий и вирусов в этиопатогенезе острых кишечных и респираторных болезней

Острые кишечные заболевания (ОКЗ) объединяют множество болезней молодняка животных, которые проявляются преимущественно в первые 7 дней после рождения диарейным синдромом, отягощающимся обезвоживанием и интоксикацией. Тяжесть течения ОКЗ варьирует от легкой до тяжелой, в зависимости от состояния факторов естественной резистентности организма животных, этиологии и эффективности лечебных мероприятий.

При изучении этиопатогенеза болезней, проявляющихся симптомокомплексом ОКЗ (синдром диареи) у новорожденных телят, подсосных поросят и ягнят, а также щенков пушных зверей, с использованием статистических и специальных методов установлено многообразие факторов, участвующих в возникновении и осложнении патологического процесса (нарушения зоогигиенических условий содержания и кормления беременных животных, несвоевременная выпойка первой порции молозива, высокая обсемененность внешней среды микроорганизмами и т.д.).

В начальный период ОКЗ у молодняка связаны преимущественно алиментарно-функциональными причинами. В дальнейшем в патогенез включаются условно-патогенные микроорганизмы и ОКЗ приобретают характер инфекционного заболевания, обусловленного чрезмерным размножением в кишечнике энтеротоксигенных, энтеропатогенных и адгезивных культур энтеробактерий.

При сравнительном анализе результатов бактериологических исследований материала от здоровых и больных ОКЗ телят в различных регионах России и стран СНГ выделены и идентифицированы основные инфекционные агенты, вызывающие ОКЗ.

В структуре выделяемой микрофлоры от здоровых животных превалируют нормальная E. сoli, Bifidum и lactobacteria. При количественном подсчете микробных клеток в 1 г исследуемого материала нормальная E. Coli, Pr. vulgaris, enterobacter, Klebsiella pneumonia, EPEC, EAEC содержались в концентрации 103-106, а бифидо- и лактобактерии - в концентрации 109-1011 клеток/г материала.

В материале от больного ОКЗ молодняка выделяется большое количество микроорганизмов из семейства Enterobacteriaceae, среди которых ведущее место по распространенности занимают энтеропатогенные (EPEC) и энтероадгезивные (EAEC) E. Coli, Pr. vulgaris, Pr. mirabilis, Kl. Pneumonia, Staphylococcus aureus, Salmonella. Средняя конценрация условно-патогенных микроорганизмов выше по сравнению с данными, полученными от здоровых животных.

Bifidum	28,1	Hafnia	1
Lactobacteria	21,1	Yersinia	2
Enterococcus	0,5	Pseudomonas	2
EAEC	0,5	Serratia	2
EPEC	1	Enterococcus	3
Klebsiella	0,5	Citrobacter	5
Citrobacter	1,5	Staphylococcus	8
Proteus	1,1	Salmonella	9
E. coli	45,7	E. coli	14
		Klebsiella	16
		Proteus	18
		EPEC и EAEC	20

Процентное соотношение процентное соотношение бактериальных культур при ОКЗ, % бактериальных культур, выделенных от здоровых телят (2-5-=дневного возраста).

Исследованиями гематологических и иммунологических показателей выявлена существенная разница в морфологических и иммунологических показателях крови здоровых и больных телят.

Количество лейкоцитов, эритроцитов и гемоглобина у больных телят выше, чем у здоровых, но при этом насыщенность эритроцитов гемоглобином более низкая у больных. В сыворотке крови больных телят значительно снижено содержание общего белка.

показатели	здоровые	Больные
Гемоглобин, г/мкл	9,82+1,9	10,25+0,9
Эритроциты, млн/мкл	7,0+0,3	8,1+0,3
Содержание гемоглобина в эритроцитах, пг	14,1+0,08	13,1+0,03
Лейкоциты, тыс/мкл	7,25+0,55	9,47+1,42
Общий белок, г/л	66,4+9,9	52,9+10,1

Средние показатели основных параметров периферической крови здоровых и больных ОКЗ телят.

Изучение факторов неспецифической резистентности новорожденных телят показало, что при ОКЗ фагоцитарная активность моноцитов остаётся на уровне здоровых, фагоцитарная активность нейтрофилов и активность комплимента достоверно снижаются, активность лизоцима повышается.

У больных ОКЗ животных в периферической крови снижается общее количество лимфоцитов главным образом за счет В-лимфоцитов, количество которых уменьшается в среднем в 2,5 раза, а также ниже уровень IgG, IgM и IgA.

При интерпретации результатов иммунограммы важное значение имеет определение степени иммунных расстройств (СИР) по методу, предложенным А.М. Земсковым (1995) в модификации Д.А. Девришова. Определение проводят по формуле

Где Мб - средняя арифметическая величина больных животных; Мзд - средняя арифметическая величина здоровых животных.

Если рассчитанная величина составляла 1-29 %, то это соответствует первой СИР, 30-60 % - второй СИР, более 60% - третьей СИР.

Наряду с определением СИР для правильной оценки полученных данных считается целесообразным определять лейко-Т-клеточный (отношение лейкоцитов к количеству Т-лимфоцитов) (норма 4-7) и лейко-В-клеточный (отношение лейкоцитов к количеству В-лимфоцитов) (норма 30) индексы, характеризующие степень нарушений Т - и В-систем иммунитета.

У больных ОКЗ животных СИР находится в пределах 25-50%.

Индексные показатели характеризуются нарушениями в иммунной системе у больных животных, особенно В-звена иммунитета.

Индексные показатели иммунограмм здоровых и больных телят.

Лейко-Т-клеточный индекс	Лейко-В-клеточный индекс
Здоровые	Больные	Здоровые	Больные
6	8	34	100

Острые респираторные заболевания (ОРЗ). Этиологические факторы их, как и ОКЗ, сложны и многообразны. Исследования многих авторов доказали, что наиболее частыми индукторами ОРЗ являются неудовлетворительные условия содержания, перенесенные ранее ОКЗ, иммунодефицитные состояния.

Клинически ОРЗ, несмотря на полиэтиологичность, проявляются примерно одинаково; некоторые отличия в симпатике отмечают по степени выраженности и последовательности их проявления. В начале заболевания у телят обычно появляются серозный ринит, конъюнктивит, учащение дыхания, затем развивается бронхит, переходящий в бронхопневмонию.

У 97% телят с признаками поражения респираторных органов Д.А. Девришов иммунофлуоресцентным методом выявил специфическое свечение с характерной локализации в эпителиальных клетках слизистой оболочки носовой полости антигенов следующих вирусов: парагриппа 3 (ПГ-3), инфекционного ринотрахеита (ИРТ), адено (АД), респираторно-синцитиального (РС) и диареи.

Многообразие инфекционных агентов также способствует возникновению смешанных инфекций.

В первые дни ОРЗ вирусные антигены и их ассоциации обнаруживаются во всех случаях, а через 10-15 дней - не во всех. В более чем 50 % случаев в сыворотке крови, полученной от больных ОРЗ телят, серологическими методами обнаруживаются антитела к вирусам ПГ-3, ИРТ, АД, РС, что подтверждает участие этих вирусов (и их ассоциаций) в этиопатогенезе ОРЗ телят.

Кроме того, бактериологическими исследованиями материала, мазков и выделений из полости носа при ОРЗ у телят обнаружены стафилококки, стрептококки, клебсиеллы, эшерихии, протеи, сальмонеллы, пастереллы (преимущественно при тяжелых формах) в первые дни болезни (при серозном воспалении передних дыхательных путей) в концентрации 102-103 микробных клеток в 1 мл, а в более поздние сроки (при слизисто-гнойных истечениях) - до 105-107 микробных клеток в 1 мл.

Следовательно, первичная роль в этиологии ОРЗ принадлежит вирусам, а условно-патогенные микроорганизмы в последующем в последующем осложняют течение ОРЗ у телят (вторичная роль).

При ОРЗ изменяются как неспецифические, так и специфические факторы иммунитета. Фагоцитарная активность нейтрофилов и активность комплемента снижается, фагоцитарная активность моноцитов практически не изменяется, а активность лизоцима имеет тенденцию к повышению. В периферической крови телят, больных ОРЗ, снижается общее количество лимфоцитов, преимущественно за счет Т-лимфоцитов, содержание которых уменьшается более чем в два раза. Уменьшение количества В-лимфоцитов и уровня иммуноглобулинов (IgG, IgM, IgA) менее существенно.

Таким образом, острые кишечные заболевания у молодняка животных вызываются главным образом условно-патогенными микроорганизмами (и сопровождаются дисбактериозом), а острые респираторные заболевания индуцируются вирусами с последующими возможными осложнениями за счет тех же условно-патогенных микроорганизмов, которые вызывают и ОКЗ. При ОКЗ и ОРЗ у телят имеют место однонаправленные изменения активности исследованных факторов неспецифической защиты и разнонаправленные изменения количества Т - и В-лимфоцитов: у новорожденных телят первичный иммунодефицит В-системы лимфоцитов является предрасполагающим для возникновения прежде всего острых кишечных заболеваний, а острые респираторные заболевания сопровождаются более выраженным вторичным иммунодефицитом преимущественно Т-системы иммунитета (Д.А. Девришов, 2000).

Учитывая наличие при ОКЗ и ОРЗ молодняка животных иммунодефицитных состояний, важную роль условно-патогенных микроорганизмов и вирусов в этиопатогенезе этих заболеваний, неэффективность во многих случаях лечения ОРЗ и ОКЗ антибиотиками (из-за приобретения устойчивости условно-патогенных микроорганизмов к большинству антибиотиков), заслуживают внимания работы, направленные на получение и использование специфических вакцин и иммунных сывороток препаратов-иммуномодуляторов и антагонистов патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. В частности, в МГАВМиБ им.К.И. Скрябина развивается новое направление по профилактике и лечению ОКЗ и ОРЗ молодняка сельскохозяйственных животных с использованием иммуномодуляторов (Т - и В-активинов), лактобактерина, поливалентных вакцин, сывороток, бактериофагов и их сочетаний, в том числе для иммунизации беременных животных с целью получения молозива, обогащенного специфическими антителами против наиболее распространенных патогенных и условно-патогенных микроорганизмов окружающей среды.

На этих, наиболее перспективных методах я и акцентирую внимание в своей курсовой работе.

2. Применение Т - и В-активина при острых кишечных и респираторных заболеваниях животных

Т-активин получен из тимуса молодых животных (крупного рогатого скота до 12-месячного возраста) путем его ацетоновой экстракции и очистки и представляет собой гетерогенный комплекс иммунокорректирующих пептидов с молекулярной массой от 1500 до 6000 Д. Технология производства Т-активина разработана НИИФХМ АМН РФ (Ю.М. Лопухин, В.Я. Арион) и МГАВМиБ им.К.И. Скрябина (Е.С. Воронин, Д.А. Девришов).

Т-активин-высокоэффективное иммуномодулирующее средство. При иммунодефицитных состояниях он нормализует количественные и функциональные показатели Т-системы иммунитета, стимулирует продукцию медиаторов клеточного иммунитета, в том числе восстанавливает активность Т-киллеров, функциональную активность стволовых гемопоэтических клеток и нормализует ряд других показателей, характеризующих Т-клеточный иммунитет.

В-активин получают из ребер молодых свиней (до 6-месячного возраста). Разработка препарата проведена на базе Института иммунологии АМН РФ (Р.В. Петров, Р.С. Степаненко, Ю.О. Сергеев и др.) и МГАВМиБ им.К.И. Скрябина (Е.С. Воронин, Д.А. Девришов). В-активин представляет собой лекарственную форму препарата, полученную на основе миелопептидов-естественных продуктов жизнедеятельности клеток костного мозга, накапливающихся в культуральной среде при культивировании этих клеток. Из культуральной среды миелопептиды выделяют гельхроматографией и ультрафильтрацией. Препарат (группа гидрофобных отрицательно заряженных пептидов с молекулярной массой 1000-3000 Д) под названием В-активина разрешен для клинического применения в ветеринарии и под названием миелопид-в медицине.

Миелопептиды вырабатываются клетками костного мозга различных видов животных и человека без дополнительного антигенного или митогенного воздействия, не обладают видовой специфичностью; их стимулирующий эффект наиболее выражен при наличии иммунодефицита. Спектр функциональной активности миелопептидов включает их способность увеличивать выработку антител, вовлекая в антителогенез дополнительное количество предшественников антителопродуцирующих клеток, стимулировать функциональную активность Т-лимфоцитов, макрофагов и нейтрофилов, влиять на дифференцировку предшественников иммунокомпетентных клеток.

Способность входящих в состав Т - и В-активинов низкомолекулярных пептидов стимулировать антителообразование, усиливать некоторые клеточные иммунные реакции, проявлять антиинфекционную активность и не оказывать при этом отрицательного влияния на организм животных позволяет использовать Т - и В-активины при кишечных и респираторных заболеваниях животных.

На основании результатов экспериментальных исследований и производственных испытаний рекомендованы следующие дозы Т-и В-активинов: Т-активин с профилактической целью - 2-4 мкг/кг массы тела, с лечебной - 4-5 мкг/кг; оптимальная терапевтическая доза В-активина - 6-9 мг/кг масся тела.

С профилактической целью Т - и В-активины применяют 1 раз в день в течение 3 дней подряд, с лечебной-1 раз в день 5-7 дней подряд.

Т - и В-активины положительно действуют на течение ОКЗ и ОРЗ и у телят, и у поросят как при искусственном заражении животных летальными дозами микроорганизмов, так и в производственных условиях. В частности, введение поросятам В-активина за сутки до заражения и на 1-3-й день после заражения летальной дозой Salmonella choleraesuis и Salmonella typhimurium способствовало выживанию 60% поросят при 100% гибели в контрольной группе (за 15 суток наблюдений). При использовании Т - и В-активинов в свиноводческих хозяйствах с профилактической целью заболеваемость поросят ОКЗ периода новорожденности снижалась в среднем на 30%, смертность - на 15%. Достаточно высока профилактическая эффективность этих препаратов и при ОРЗ как в отношении заболеваемости и смертности поросят, так и в отношении среднесуточного прироста массы тела.

Результаты профилактического действия иммуномодуляторов при респираторных заболеваниях поросят (возраст 35-40 дней).

Способ профилактики	Кол-во животных, гол	Заболело	Продолжитель- ность лечения, дни	Выбыло	Среднесуточный прирост массы тела, г	Профилактическая эффективность, %
		%	Гол.		%	Гол.
Т-активин	300	34	11,3	3-5	0	0	280	88,7
В-активин	300	29	9,7	3-5	1	0,3	287	90,3
контроль	300	96	32,0	6-8	27	9,0	170	61,0

Аналогичные (положительные) результаты получены и при использовании Т-и В-активинов у телят при заражении их смесью культур Salmonella Dublin и Salmonella Typhimurium, а также в производственных условиях.

Д.А. Девришов (2000) установил, что Т - и В-активины у новорожденных телят повышают в крови количество Т - и В-лимфоцитов, IgG, функциональную активность нейтрофилов и моноцитов, активность комплемента и лизоцима сыворотки крови, что и способствует положительным результатам при их использовании.

Профилактическая и лечебная активность иммуномодуляторов при острых кишечных заболеваниях новорожденных телят.

Способ профилактики	Кол-во телят, гол	Заболело	Профилакти ческий эффект,%	Подвергнуто лечению, гол	Проведено лечение	Пало	Среднесуточный прирост, г
		Гол.	%			гол	%	Гол.	%
Т-активин	2500	700	28	72	700	645	92	55	2	520
В-активин	2300	851	37	63	851	796	94	55	2	498
Суммар- ный показатель	4800	1551	32	67,7	1551	1441	93	110	2	509
контроль	580	482	83	17,24	482	357	74	125	22	320

Результаты профилактической эффективности иммуномодуляторов при ОРЗ телят (обобщенные данные)

Способ профилактики	Количество животных, гол	Заболело	Продолжительность болезни, дни	Выбыло	Среднесуточный прирост	Профилактический эффект, %
		гол	%		гол	%
Т-активин	2700	196	7,3	5-7	38	1,48	780	92,7
В-активин	1100	140	12,7	4-6	40	3,6	675	87,3
Контроль (антибиотики)	1720	678	39,4	10-15	178	10,3	480	60,9

Результаты совместного применения Т - и В-активина при профилактике ОРЗ

Способ профилактики	Кол-во животных, гол	Заболело телят	Продолжительность болезни, дни	выбыло	Среднесуточный прирост, г	Профилактический эффект
		гол	%		гол	%
Т - и В-активин	1170	60	5,1	4-7	10	1,1	720	94,9
контроль	1210	510	42	10-17	60	5,0	430	58,0

Известно, что новорожденные у всех копытных животных имеют врожденный физиологический иммунодефицит, который компенсируется поступлением материнских антител из молозива в кровь вследствие проницаемости эпителия кишечника для нативных иммуноглобулинов в течение 24-48 ч после рождения.

В организме матери могут образовываться и переходить в молозиво лишь специфические антитела против антигенов, вступавших в контакт с иммунной системой материнского организма. Поэтому с целью повышения в молозиве концентрации антител против наиболее распространенных возбудителей ОКЗ у молодняка сельскохозяйственных животных изготовлены и испытаны различные варианты вакцин.

Наиболее эффективной для профилактики ОКЗ животных оказалась ассоциированная бактериальная вакцина из стерильных микробных взвесей десяти вакцинных штаммов энтеробактерий (вакцина ОКЗ) в фенолизированном изотоническом растворе натрия хлорида, депонированная на гидроксиде алюминия. Разработана она в МГАВМиБ им.К.И. Скрябина.

Компоненты вакцины ОКЗ

состав	Концентр., млрд. кл. в 1 мл	Объёмный процент
E. coli O9K99	1,8-2,2	5,0-6,0
E. coli O138K88	1,8-2,2	5,0-6,0
E. coli 200 (O119)	1,8-2,2	5,0-6,0
P. vulgaris 198	1,8-2,2	5,0-6,0
Pr. mirabilis 199	1,8-2,2	5,0-6,0
Kl. pneumaniae 201	1,8-2,2	5,0-6,0
Kl. pneumaniae 202	1,8-2,2	5,0-6,0
Salmonella typhimurium 195	0,9-1,1	2,0-3,0
Salmonella enteritidis 197	0,9-1,1	2,0-3,0
Salmonella dublin 196	0,9-1,1	2,0-3,0
Гидроксид алюминия	--	32,0-35,0
Фенол	--	0,2-0,25
Хлорид натрия, изотонический раствор	--	До 100

В экспериментах на животных установлено, что максимальный защитный эффект вакцины достигается только при наличии в её составе всех десяти компонентов. Исключение даже одного из них снижает эффективность вакцины. Наличие в препарате разных по природе антигенных комплексов позволяет в значительной степени расширять спектр эффективности препарата и обеспечивать защиту при смешанных кишечных инфекциях, которые наиболее часто наблюдаются в животноводческих хозяйствах.

При вакцинации глубокостельных коров (в сервис-периоде) ассоциированной бактериальной вакциной из 10 штаммов энтеробактерий (вакцина ОКЗ) у коров в сыворотке крови достоверно повышается уровень антител ко всем штаммам энтеробактерий, но больше всего к Proteus, Salmonella и E. сoli. Увеличение уровня специфических антител в сыворотке крови коров более выражено при совместном применении вакцины ОКЗ и Т-активина.

В молозиве, полученном от коров, иммунизированных вакциной ОКЗ, особенно совместно с Т-активином, существенно повышается концентрация IgG и IgM. Наиболее высокий уровень антител выражен в молозиве первого дня лактации; на 2-3 день он снижается, но сохраняется на более высоком уровне по сравнению с не привитыми вакциной ОКЗ.

Уровень иммуноглобулинов в сыворотке молозива вакцинированных коров-матерей, М+m

Способ профилактики	Класс Ig	Сроки исследования после отела, день	Д+Sd по отношению к фону, день
		первый	второй	третий	первый	второй
Вакцина ОКЗ	IgG	44,2+8,9	27,4+5,8	20,0+1,1	16,8+5,8*	24,2+1,2*
	IgM	14,7+0,8	7,2+2,0	3,9+1,2	7,5+2,0*	10,8+1,3*
Вакцина ОКЗ+Т-активин	IgG	57,97+0,56	38,8+8,7	23,0+2,6	19,1+8,7*	34,9+2,6*
	IgM	12,0+0,9	7,7+1,3	4,5+0,7	4,3+1,3*	7,5+0,8*
контроль	IgG	32,6+6,3	22,9+3,7	16,4+1,2	9,7+3,7*	16,2+1,3*
	IgM	11,1+1,6	5,4+3,8	3,1+0,9	5,7+3,8*	8,0+1,0*

*P<0,05.

Результаты клинических наблюдений свидетельствуют о более низкой заболеваемости и смертности телят, родившихся от коров, иммунизированных вакциной ОКЗ, особенно при её сочетании с Т-активином.

Заболеваемость и сохранность новорожденных телят на фоне колострального иммунитета

Способ профилактики	Кол-во телят, гол	заболело	пало	Сохранность
		гол	%	гол	%
Вакцина ОКЗ	88	15	17,04	1	1,13	98,87
Вакцина ОКЗ+Т-активин	277	45	16,24	3	1,08	98,02
Контроль (моновакцины)	62	51	82,25	8	12,9	87,1

Результаты сравнительных производственных испытаний вакцины ОКЗ на телятах в возрасте 20-60 дней

Способ профилактики	Количество телят, гол	Заболело	Пало	Сохранность
		гол	%	гол	%
Вакцина ОКЗ	3156	387	12,26	21	0,6	99,4
Вакцина ОКЗ+Т-активин	3465	320	9,23	0	0	100
Контроль (моновакцины)	195	102	52,3	25	12,8	87,2

После ослабления колострального иммунитета против ОКЗ эффективна профилактическая вакцинация телят 20-60-дневного возраста вакциной ОКЗ. Заболеваемость и смертность телят до 2-го возраста, иммунизированных вакциной ОКЗ, особенно в сочетании с Т-активином, существенно ниже, чем телят привитых моновакцинами против сальмонеллеза и колибактериоза.

Известно, что уровень заболеваемости новорожденных животных зависит от полноценности и своевременного получения первой порции молозива. Телята, которые не получили своевременно первую порцию молозива, в большинстве случаев заболевают ОКЗ различной степени выраженности. В патогенезе болезни всегда участвуют энтеробактерии. Для компенсации специфических антител на практике применяют различные моновалентные гипериммунные сыворотки (против колибактериоза, сальмонеллеза). Эффективность указанных сывороток из-за низкой специфической активности и отсутствия антител к большинству наиболее распространенных возбудителей кишечных инфекций невелика при применении, как с профилактической, так и с лечебной целью.

В МГАВМиБ им. К.И. Скрябина получена поливалентная сыворотка с высокой специфической активностью по отношению к возбудителям, наиболее часто принимающим участие в этиопатогенезе ОКЗ у новорожденных животных. Волов-продуцентов поливалентной сыворотки гипериммунизировали смесью 10 инактивированных антигенов с общей концентрацией 15+2 млрд микробных клеток в 1 мл путем многоцикловой иммунизации с интервалом в 5 дней. Поливалентная гипериммунная сыворотка крови против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции телят, ягнят и поросят производства Краснодарской биофабрики имеет достаточно высокий уровень антител ко всем индуцирующим их антигенам и высокоэффективна для профилактики ОКЗ молодняка животных при их пассивной иммунизации.

3. Использование для профилактики и лечения острых кишечных заболеваний лактобактерина и бактериофагов

В связи с тем, что при ОКЗ молодняка животных часто возникает дисбактериоз, а антибактериальные препараты, в частности антибиотики, нередко его усугубляют, в МГАВМиБ созданы препараты-антагонисты условно-патогенной микрофлоры - лактобактерин и литически активные к этим микроорганизмам препараты на основе бактериофагов.

Лактобактерин создан с использованием культур лактобактерий двух штаммов-Lb. fermentis и Lb. plantarum из коллекции музейных культур нижегородского НИИЭМ. Исследования (Д, А. Девришов, 2000) показали, что штаммы лактобактерий при совместном культивировании с условно-патогенной микрофлорой на миллипоровых фильтрах резко угнетают рост протей, клебсиелл, энтеропатогенных эшерихий и других микроорганизмов с подавлением у них синтеза полисахаридов, адгезивных свойств, деформацией клеток за счет нарушения структуры клеточной стенки, превращением бактерий в мелкие извилистые палочковидные клетки.

Применение лактобактерина с первого дня рождения телят в каждое очередное кормление в течение 3 дней снижает уровень обсемененности кишечника условно-патогенной микрофлорой, профилактирует желудочно-кишечные заболевания, повышает усвояемость корма. Поросятам лактобактерин выпаивают ежедневно в течение первых 3 дней после рождения 1-3 раза в день. Существенных отличий при однократном и трехкратном введении лактобактерий у поросят не выявлено.

Следует отметить, что применение лактобактерина в лечебных целях при ОКЗ у молодняка без дополнительного использования симптоматических и диетических средств недостаточно эффективно, так как лактобактерин не успевает репродуцироваться и колонизироваться на слизистой оболочке кишечника из-за усиления перистальтики и соответственно учащения дефекации жидкими каловыми массами. В комплексной терапии ОКЗ лактобактерин играет ведущую роль, способствуя восстановлению микробиоценоза пищеварительного тракта путем подавления и элиминации из желудочно-кишечного тракта патогенных и условно-патогенных бактерий.

До сих пор перспективно использование в лечебно профилактических целях высокоспецифичных и безвредных бактериофагов. Однако монофаги при кишечных инфекциях в связи с участием в их возникновении множества возбудителей в условиях ферм оказались недостаточно эффективны. Поэтому при ОРЗ более эффективными стали полифаги.

Культивировать и хранить фаги необходимо раздельно, так как возможно угнетение репродукции клеток одних штаммов другими за счет конкуренции. При ОРЗ комплексное применение бактериофагов путем их смешивания и составления полифагов оказывает лечебное действие у более 98% больных телят.

Следует иметь в виду, что иммуномодулирующей профилактике и терапии болезней молодняка сельскохозяйственных животных должен предшествовать (или проводиться одновременно) общепринятый комплекс мероприятий по получению здорового молодняка (В.В. Субботин, М. А, Сидоров, 2001):

обеспечение организма матери оптимальными условиями кормления и содержания;

своевременная выпойка новорожденным молозива первого удоя (не позднее 2 часов после рождения) и только от здоровых матерей;

компенсация физиологического дисбактериоза назначением (после первой же дачи молозива) новорожденным пробиотиков-препаратов, содержащих нормальную микрофлору кишечника;

соблюдение зоогигиенических правил содержания новорожденных;

своевременное проведение ветеринарно-санитарных мероприятий;

совместное содержание новорожденных (в одном секторе, секции и т.д.) поросят и телят с разницей в возрасте не более 3-4 дней, т.е. с учетом особенностей становления кишечной микрофлоры.

III. Пути повышения резистентности сельскохозяйственных животных

Появление новых физических (радиация), химических (гормоны, антибиотики, пестициды, диоксины) и биологических (ВИЧ-инфекция, прионы) факторов, в том числе антропогенного характера, оказывающих влияние как на патогенность микроорганизмов (стимулируя или ослабляя её), так и на резистентность человека и животных (стимулируя или ослабляя естественную резистентность и специфический иммунитет), нередко приводит к модификации иммунной системы, вызывая иммунодефицитные, аутоиммунные и аллергические состояния.

С иммунобиологических позиций состояние животных в современных условиях характеризуется снижением иммунологической реактивности организма. По нашим данным, более 80% животных имеют различные отклонения в деятельности иммунной системы, что повышает риск заболеваемости острыми болезнями, обусловленными оппортунистическими (условно-патогенными) микроорганизмами.

Развитию иммунодефицитных состояний и других нарушений иммунной системы способствуют содержание большого количества животных на ограниченных площадях, несвоевременная организация и проведение ветеринарно-санитарных, профилактических и противоэпизоотических мероприятий, недостаток или отсутствие инсоляции, активного моциона, полноценного питания. Кроме того, в процессе профилактики и лечения различных заболеваний животных нередко наблюдают достаточно низкую эффективность химиотерапевтических препаратов и других традиционных методов, что чаще всего связывают с низкой иммунологической реактивностью организма животных.

В связи с этим возникает необходимость в более широком использовании уже имеющихся и в разработке новых различных приемов и средств, способных стимулировать защитные силы организма животных. Особого внимания для повышения резистентности сельскохозяйственных животных заслуживает использование генетических и фенотипических факторов, а также неспецифических и специфических иммуномодуляторов.

1. Генетические факторы повышения резистентности

Известно, что существуют зависимые от генотипа видовые, породные и индивидуальные проявления естественной резистентности, а иногда и их взаимосвязь с продуктивностью животных. Так, в работе С.И. Плященко установлено, что у поросят с большей массой при отъёме показатели естественной резистентности и сохранность были выше. К.В. Жучаев установил, что повышенную иммунореактивность и жизнеспособность имеют поросята из "гнезд" со средней для популяции силой иммунного ответа.В.И. Степанов и соавт. выявили у степного мясного типа скороспелой мясной породы свиней большую развитость механизмов клеточной и гуморальной защиты по сравнению со свиньями других типов и пород, а также положительную взаимосвязь между показателями естественной резистентности и уровнем и характером продуктивности свиней. Более высокую молочную продуктивность и более высокий уровень факторов естественной резистентности имеют козы зааненской породы по сравнению с местными грубошерстными (В.В. Ермаков и соавт., 1999).

Хотя специфический (т.е. приобретенный) иммунитет не передается по наследству, существует зависимость от генотипа интенсивности иммунного ответа на различные антигены, причем гены иммунного ответа (Ir-гены) наследуются по доминантному типу. Поэтому при скрещивании между собой гетерозиготных высоко - и низкореактивных животных получают более высокореактивное (на определенный антиген) потомство. При этом возможно использование традиционных методов селекционной работы (путем выведения линий и пород животных с высоким иммунологическим статусом), а также методов трансплантации эмбрионов (от двух и более родительских пар) и клонирования высокопродуктивных (и одновременно высокорезистентных) животных. Перспективно использование современных методов введения генетического материала (микроинъекции фрагментов ДНК) в эмбрионы животных на ранних стадиях их развития. Таким путем можно создать трансгенных сельскохозяйственных животных, устойчивых к инфекционным заболеваниям (М.М. Иванова, Б.С. Народицкий, 2000).

2. Использование фенотипических факторов

В пределах нормы реакции данного генотипа животных на конкретный антиген возможно фенотипическое (модификационное) изменение иммунной реактивности животного под влиянием факторов внешней среды и путем антропогенного воздействия.

Для нормального функционирования всех звеньев защиты организма-неспецифических факторов защиты, специфической системы иммунитета и механизмов их регуляции - необходимы: полноценное сбалансированное питание, соблюдение соответствующих зоогигиенических условий содержания животных, достаточная двигательная активность, рациональный режим дня, своевременные профилактические прививки против инфекционных болезней и т.д.

От качества питания, и особенно от содержания в корме достаточного количества незаменимых аминокислот, полиненасыщенных жирных кислот, минеральных веществ, витаминов, его калорийности, в значительной мере зависит величина иммунного ответа на инфекционные возбудители и другие чужеродные агенты.

Пластические и энергетические компоненты корма необходимы для обеспечения непрерывно протекающих в организме процессов пролиферации, дифференцировки клеток иммунной системы, синтеза антител, рецепторов иммуноактивных веществ, участвующих в иммунном ответе. При этом важно учитывать не только общую питательность рациона, но и его качественный состав.

Незаменимые аминокислоты необходимы для синтеза состоящих из аминокислот антител, цитокинов, компонентов комплемента, лизоцима, интерферона, процессов пролиферации Т-, В-лимфоцитов и вспомогательных клеток.

Полиненасыщенные жирные кислоты (линолевая, линоленовая, арахидоновая), будучи незаменимыми (неспособными синтезироваться в организме животных), обеспечивают нормальное функционирование клеточных мембран (входя в их состав), а продукты метаболизма арахидоновой кислоты, образующиеся в тучных и других клетках, являются активными участниками местной воспалительной реакции, направленной на устранение патогена. Полиненасыщенные жирные кислоты некоторые авторы до сих пор относят к витаминам F.

Для предотвращения иммунодефицитов и нарушения механизмов регуляции иммунного ответа необходимо наличие в рационе всех витаминов, и особенно тех, которые не синтезируются в организме животных.

В частности, витамин А (ретинол), являясь прогормоном, после превращения в организме в гормон (ретиноевую кислоту) стимулирует (путем активации генов) синтез антител, компонентов мембран, влияет на эпителизацию слизистых оболочек и кожи, тем самым участвуя в повышении устойчивости организма к различным патогенам.

Витамин D (кациферол), превращаясь в организме животного в гормон (кальцитриол), участвует в регуляции иммунного ответа. Кальцитриол подавляет активность Тх1-лимфоцитов, участвует в стимуляции макрофагов (они имеют рецепторы для кальцитриола), индуцируют синтез белков, регулирующих транспорт кальция, необходимого для нормального функционирования клеток, в том числе участвующих в иммунном ответе.

Витамин Е (токоферол), являясь наиболее активным природным антиоксидантом, разрушающим реактивные формы кислорода, стабилизирует мембраны клеток, в том числе фагоцитов, путем предотвращения окисления входящих в их состав полиненасыщенных жирных кислот и витамина А. Кроме того, существует прямая связь между витамином Е и тканевым дыханием. Возможно, витамин Е участвует в регуляции биологического окисления, процесса транскрипции генов и синтеза белка в клетках, но его роль в этих процессах пока недостаточно выяснена.

Для процессов биологического окисления и синтеза АТФ (основного источника энергии в клетке) необходимы витамины никотиновой кислоты (её амид), рибофлавин, входящие в состав коферментов, и др. Для процессов пролиферации клеток иммунной системы существует необходимость поступления в организм витаминов В6 (пиридоксина) и фолиевой кислоты. Индуктором интерферона и одним из антиоксидантов является аскорбиновая кислота.

Для нормального функционирования клеток, участвующих в иммунном ответе, необходимы также различные макро - и микроэлементы, и особенно кальций, железо, медь, селен, цинк и др.

При несоблюдении зоогигиенических правил содержания и кормления животных возможны за счет выделений потовых и сальных желёз и скопления грязи создание условий для развития условно-патогенных микроорганизмов на поверхности кожи животных и как следствие процессов гниения, расчесов кожи, нарушение механических и химических факторов защиты, "открытие" так называемых "ворот инфекции". При этом возможны за счет размножения условно-патогенных микроорганизмов в окружающей среде и их поступления в организм животных изменение микробиоценоза в пищеварительном тракте и возникновение различных заболеваний, в том числе острых кишечных, а при сочетании с низкой температурой в помещении и