Принципы классификации и характеристика отдельных групп микроорганизмов. Классификация бактерий и их ультраструктура

Тема 1.2. «Принципы классификации и характеристика отдельных групп микроорганизмов. Классификация бактерий и их ультраструктура. Особенности строения спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм, актиномицет и грибов».

План.

Классификация микроорганизмов.
Морфология и основные формы бактерий.
Строение бактериальной клетки.
Капсулы, жгутики, споры и их функции.
Субклеточные формы существования бактерий.
Определение понятий «полиморфизм микробов и морфологические свойства микробов».
Особенности строения спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм, актиномицет и грибов.
Понятие о микроскопическом методе исследования и его значение для лабораторной диагностики.

1. Классификация микроорганизмов.

Многочисленные микроорганизмы (бактерии, грибы, простейшие, вирусы) строго систематизированы в определённом порядке по их сходству, различиям и взаимоотношениям между собой.

Этим занимается специальная наука - систематика микроорганизмов. Раздел систематики, изучающий принципы классификации, называется таксономией (от греч. taxis- расположение, порядок). Таксон - группа организмов, объединённая по определённым однородным свойствам в рамках той или иной таксономической категории. Основная таксономическая единица - вид.

Вид - это совокупность микроорганизмов, имеющих единые происхождение и генотип, сходных по своим биологическим признакам и обладающих наследственно закреплённой способностью вызывать в стандартных условиях качественно определённые процессы.

В медицинской микробиологии принята Международная классификация «Определитель бактерий» Д.Берги (8-ое изд-е. 1974г., в составлении его принимал участие 131 автор из 15 стран). В соответствии с систематикой Берги к микроорганизмам относят прокариоты и эукариоты.

Царcтво прокариотов - Procaryotae- состоит из 2-х отделов:

I - цианобактерии (Cyanobacteria) - сине-зелёные водоросли;

II - бактерии (Bacteria).

К Iотделу относятся непатогенные микробы, обитающие во внешней среде. Их мед.микробиология не изучает.

Ко IIотделу отнесены различные микробы, обитающие как во внешней среде, так и в организме человека и животных, среди них и патогенные микробы.

Отдел Bacteriaсостоит из 19 групп, в патологии человека наибольшее значение имеют следующие группы:

бактерии - Bacteria- размер которых колеблется от 0,15 до 40 микрон;
спирохеты - Spirochaetae- микробы, занимающие промежуточное положение между бактериями и простейшими (7 - 500 х 1,5 мк ;
риккетсии –Rickettsict - занимают промежуточное положение между бактериями и вирусами (0,3 - 0,4 мк);
микобактерии - Mycobacterium- возбудители туберкулёза и лепры (проказы).

Отличительная черта прокариотов та, что они не имеют диффферек-цированного ядра!

К эукариотам - высшим микроорганизмам, имеющим диффер. ядро и клетки, сходные по строению с растительными и животными клетками, относят:

—водоросли;
- грибы;
- простейшие.

Они не включены в «Определитель ...» Берги, они имеют другую систему

классификации.

Вирусы относятся к особому царству «Vira» и также имеют свою систематику.

С 1 января 1980 года введён новый Международный кодекс номенклатуры бактерий, в котором для прокариотов рекомендованы следующие таксономические категории:

подцарство - Procaryotae

отдел -bacteria,

класс - Classis

порядок - Ordo

семейство - Familia

род - Genus

вид - Species

подвид –

варианты:

морфовары (отличие от морфологии)
резистенсвары(отличие по устойчивости к антибиотикам)
серовары (отличие по антигенам)
фаговары (отличие по чувствительности к бактериофагам)
биовары (отличие по биологическим свойствам)

В микробиологии широко применяются термины «штамм», «клон», «чистая культура».

«Штаммами» - называют различные микробные культуры одного и того жевида, выделенные из разных источников, или даже из одного источника, но в разное время.

Штамм более узкое понятие, чем вид или подвид.

«Клон» - это культура микробов, выращенная из единственной микробной клетки.

«Чистая культура» - это популяция микробов, состоящая из особей одного вида.

2. Морфология и основные формы бактерий.

Бактерии (от лат. bacteria-палочка) представляют собой в основном одноклеточные организмы, лишённые хлорофилла, отнесены к прокариотам. Величина их измеряется в микрометрах (мкм) и варьирует от 0,1 - 0,15 (микоплазмы) до 16 —мкм (спириллы).

Большинство патогенных бактерий - 0,2-10 мкм. В записной книжке известного писателя Ильи Ильфа есть подслушанная где-то фраза: «Такой некультурный человек, что видел во сне бактерию в виде большой собаки». Масса микробов также ничтожно мала, в 1 г содержится примерно 100 млрд. бактерий. Существует 4 основные формы бактерии:

– палочковидная (палочки)
- шаровидная (кокковидная, кокки)
спиралевидная (извитая).

I. Палочковидные в зависимости от спорообразования подразделяются на бактерии, бациллы и клостридии.

Бактерии - палочки, не образующие споры (энтеробактерии).

Бациллы - палочки, образующие споры в аэробных условиях (бациллы сибирской язвы).

Клостридии - палочки, образующие споры в анаэробных условиях (клостридии

столбняка, клостридии ботулизма).

Большинство палочек имеет форму прямого цилиндра, некоторые имеют слегка изогнутую форму (микобактерии), изогнутая форма в виде запятой имеется у вибрионов (холерный вибрион).

Длина палочек от 1 до 8 мкм, в поперечнике - 0,5-2 мкм. Концы палочек могут быть закруглёнными (большинство), ровными, как бы обрубленными (сиб.язв.бациллы), заострёнными (фузобактерии), утолщёнными (возб-ль дифтерии).

Большинство палочек по отношению друг к другу располагаются без определённой системы, т.е. беспорядочно, некоторые располагаются попарно диплобактерии (клебспеллы), некоторые - цепочкой стрептобактерии (возб. мягкого шанкра), есть стрептобациллы (возб. сиб.язвы).

II. Шаровидные - кокки (kokkos- зерно), могут иметь сферическую форму, овальную, бобовидную, канцетовидную.

В зависимости от взаимного расположения кокки делятся на:

микрококки - располагаются одиночно, беспорядочно (это сапрофиты, в воздухе, в воде в ротовой полости и на коже организма человека);
диплококки - попарно (фекальный стрептококк, гонококки, пневмококки, менингококки);
тетракокки - по четыре (стафилококки);
стафилококки - скоплениями в виде виноградной грозди или неправильной формы;
стрептококки - в виде цепочек разной длины;
сарцины - в виде тюков по 8,16 и т.п.

III. Спиралевидные бактерии подразделяются на:

спириллы - (spira- завиток) имеют вид штопорообразных клеток (1-2 завитка); из патогенных известен 1 вид - Spirillumminor–возбудитель содоку (болезни укуса крыс).
спирохеты - тонкие длинные спирально извитые бактерии, отличающиеся от спирилл большим количеством завитков и подвижностью (спирохеты сифилиса, возвратных тифов и др.)

Непатогенные для человека бактерии, кроме перечисленных форм, могут быть иной формы: замкнутого или незамкнутого кольца, правильной шестиугольной звезды, иметь выросты, встречаются червеобразные бактерии.

IV. Ветвящиеся (нитевидные) грам+бактерии – актиномицеты.

Актиномицеты (actis - луч, mykes - гриб) - «лучистые грибы» - это многочисленная группа микробов, включённых в порядок Actinomycefales, включающий 3 семейства: Actinomycetaceae, Strepfomycefaceae, Nocardiaceae. Антиномицеты имеют вид палочек, небольших разветвлённых нитей (ceм. Actinomycefaceae) или длинных тонких несептированных ветвящихся гиф (ceм.Streptomycefaceae). Некоторые актиномицеты образуют микрокапсулу; жгутиков не имеют, истинных спор не образуют. Актиномицеты образуют мицелий —нитевидные переплетающиеся клетки (гифы). Гифы актиномицет могут распадаться на палочки и кокки. Размеры актиномицет колеблются от 5,0- 7,0 до 100 мкм и более в длину и 0,5-2 мкм в ширину. Размножаются простым поперечным делением, путём прорастания гиф и спор, почкованием.

3. Строение бактериальной клетки.

Размеры бактерий измеряются в микрометрах - мкм, т.е. 1 мм = 1000 мкм, а отдельные компоненты бактерий измеряются в нанометрах - нм; 1 мкм =1000нм. Структуру бактерий изучают с помощью электронной микроскопии целых клеток и их ультратонких срезов.

Основными структурами бактериальной клетки являются: клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма с включениями, ядерное вещество, называемое нуклеоидом. Бактерии могут иметь и дополнительные структуры: капсулу или микрокапсулу, слизь, жгутики, фимбрии, пили, споры. Дополнительные структуры могут быть, а могут отсутствовать.

Клеточная стенка - прочная, упругая структура, придающая бактерии определённую форму и вместе с подлежащей ЦПМ, сдерживающая высокое осмотическое давление в клетке.

Она участвует в процессе деления клетки и транспорте метаболитов. У грам +бактерий и у грам- бактерий клеточная стенка имеет разную толщину и химический состав, что и определяет их отношение к окраске по Граму:

		грам +	грам-
1)	толщина клет. стенки	толще, 50нм и более	тоньше
2)	полисахариды, липиды, белки	в небольшом количестве	в большом количестве
3)	пептидогликан (мудреин, мукопепдит)	40 - 90%	5-10%
4)	тейхоевые кислоты	+	-
5)	магниевая соль РНК	в большом количестве	в незначительном количестве

Способность грам+ бактерий при окраске по Граму удерживать генциановый фиолетовый в комплексе с йодом (сине-фиолетовая окраска бактерий) связана со свойством пептидогликана взаимодействовать с краской (образуется стойкое соединение). Обработка окрашенного по Граму мазка спиртом не разрушает этого соединения, более того, спирт вызывает сужение пор в пептидогликане и тем самым задерживает краску в клеточной стенке.

Грам - бактерии образуют непрочное соединение клеточной стенки с фиолетовым красителем, которое легко разрушается спиртом, и при окраске мазков фуксином они окрашиваются в красный цвет.

ЦПМ - 3-х - слойная структура, окружает наружную часть цитоплазмы; состоит из фосфолипидов и белков, некоторые из них являются пермеазами. ЦПМ является динамичесой структурой с подвижными компонентами. Она участвует в регуляции осмотического давления, транспорте веществ и энергетическом метаболизме клетки.

При избыточном росте, по сравнению с клеточной стенкой, ЦПМ образует впячивания (инвагинаты) в виде сложно закрученных мембранных структур, называемых мезосомами. Есть ещё внутриплазматические мембраны, которые, как и мезосомы, участвуют в делении клетки, обепечивая энергией синтез клеточной стенки, спорообразование. Цитоплазма занимает основной объём клетки и состоит из растворимых белков. В цитоплазме имеются различные включения - полисахариды, поли-р-масляная кислота и полифосфаты (валютин). Они накапливаются при избытке питательных веществ в окружающей среде и выполняют роль запасных веществ для питания и энергетических потребностей.

Нуклеоид - эквивалент ядра у бактерий. Нуклеоид расположен в центральной зоне бактерий в виде двунитчатой ДНК, замкнутой в кольцо и плотно уложенной наподобие клубка. Он не имеет ядерной оболочки, ядрышка и основных белков. Обычно в бактериальной клетке содержится одна хромосома, представленная замкнутой в кольцо молекулой ДНК.

Нуклеоид выявляется в световом микроскопе после окраски по Фельгену или Гимзе.

4. Капсулы, жгутики, споры и их функции.

Некоторые бактерии (пневмококки, клебмеллы) образуют капсулу. Капсула —слизистое образование, прочно связанное с клеточной стенкой, имеющее чётко очерченные границы внешние. Капсула различима в мазках из патологического материала. В чистых культурах капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски, создающих негативное контрастирование вещества капсулы, т.к. сама капсула остаётся неокрашенной, бесцветной (выявление капсул по Бурри, по Бурри - Гинсу, по Ребигеру и др.). Капсула гидрофильна, она препятствует фагоцитозу бактерий. Многие бактерии образуют микрокапсулу - слизистое образование, выявляемое при электронной микроскопии.

От капсулы следует отличать слизь - мукоидные экзополисахариды, не имеющие чётких внешних границ.

Капсула и слизь предохраняют бактерии от повреждений, высыхания, т.к. они гидрофильны и хорошо связывают воду; препятствуют действию защитных факторов макроорганизма и бактериофагов.

Жгутики - бактерий определяют их подвижность. Жгутики представляют собой тонкие нити, берущие начало от ЦПМ; длина их больше, чем длина клетки - 3-12 м/см, а толщина 12-20 нм. Жгутики прикреплены к ЦПМ и клеточной стенке специальными дисками. По химическому составу они состоят из белка —флагеллина, обладающего антигенной специфичностью. Жгутики выявляют с помощью электронной микроскопии, сложных методов окраски (по Лефсрлеру), в нативных препаратах «раздавленная» или «висячая» капля в тёмном поле зрения или культуральным способом (посев в столбик полужидкого агара: помутнение всей среды указывает на подвижность, если помутнение только по ходу укола, значит культура неподвижная). Подвижные бактерии, т.е. имеющие жгутики, делятся на следующие группы:

монотрихи - имеют один жгутик (холерный вибрион);
лофотрихи - имеют пучок жгутиков на одном из концов клетки;
амфитрихи - имеют по одному жгутику или пучку жгутиков на противоположных концах клетки;
перитрихи - имеют десятки и сотни жгутиков, отходящих по периметру бактерий (КП, протей).

Фимбрии и пили - нитевидные образования, долее тонкие и короткие, чем жгутики. Они отходят от поверхности клетки, среди них выделяют: пилы, ответственные за адгезию, т. е. прикрепление бактерий к поражаемой клетке, ответственные за питание, водно-солевой обмен и половые или конъюгационные пили.

Споры - своеобразная форма покоящихся бактерий. Их образуют только грам+бактерии. Они образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий, сопровождающимся высушиванием, дефицитом питательных веществ и т.д. При этом внутри одной бактерии образуется одна спора. Поэтому образование спор способствует сохранению вида и не является способом размножения, как у грибов. У бацилл споры не превышают диаметра клетки, а у клостридий - превышают, и они поэтому принимают форму веретена.

Спорообразование, форма и расположение спор (центральное, терминальное, субтерминальное) в клетке (вегетативной) являются видовым свойством бактерий, что позволяет отличать их друг от друга. Форма спор может быть овальной, шаровидной; расположение в клетке терминальное - на конце палочки (Cl. tetani); субтерминальное - ближе к концу палочки (Cl.botalinum) и центральное (Вас. anthracis).

Спора более устойчива к действию внешних факторов, чем вегетативная клетка, например, в почве может сохраняться десятки лет. В благоприятных условиях споры прорастают, проходя 3 стадии: акитивацию (готовность к прорастанию), инициацию, вырастания. При этом их одной споры образуется одна бактерия.

5. Субклеточные формы существования бактерий.

После обработки бактериальной (клетки) культуры лизоцимом или пенициллином могут образоваться формы, называемые протопластами, сферопластами и L-формами бактерий.

Протопласты —полностью лишены клеточной стенки, образуются у грам+ бактерий.

Сферопласты - частично лишены клеточной стенки, формы грам- бактерий. Они приобретают сферическую форму, т.к. у них отсутствует пептидогликан. Они становятся осмотически хрупкими, менее активными в биохимическом отношении, более проницаемыми и чувствительными к различным внешним воздействиям. В изотонической среде происходит лизис (растворение) этих бактерий. Для сохранения жизнеспособности их помещают в гипертонические среды, приготовленные из растворов сахарозы, натрия хлорида или особых стабилизаторов. Протопласты и сферопласты сохраняют определённую метаболическую активность, но не способны к размножению.

L-формы - бактерии, полностью или частично лишённые клеточной стенки, либо утратившие способность синтезировать её предшественников, но сохранившие способность к размножению. Утрата клеточной стенки ведёт к изменению морфологии клетки и нарушению её деления. Палочки, кокки и др. прокариоты, у которых получены и -формы, становятся морфологически неразличимы. Для /,-форм характерно наличие крупных (5-50мкм) или мелких (0,7-1мкм) сферических тел. Они содержат включения в виде вакуолей и гранулы. Получают L-формы при помощи препаратов, ингибирующих или разрушающих пептидогликан клеточной стенки (пенициллин, лизоци.). Различают стабильные (не реверсируют) и нестабильные (реверсируют) формы. и -формы стрептококки, гонококки, бациллы, микобактерии, корниебактерии, энтеробантерии, бактероиды идр.

L-формы проходят через бактериальные фильтры. Биохимическая активность, вирулентность, антигенность ниже, а устойчивость к действию Am, антибиотиков выше по сравнению с аналогичными свойствами исходных культур. Стабильные L -ф. резистентны к фагам. Им придаётся большое значение в развитии хронических инфекций, носительства. Протопласты резистентны к действию фагов, а сферопласты сохраняют чувствительность к фагам.

При устранении индуцирующего фактора (вызвавшего их образование) протопласты и сферопласты могут в среде с желатиной и др. стабилизаторами реверсировать (снова превращаться) в исходную бактериальную форму. выявляют протопласты и сферопласты фазово-контрастной микроскопией влажных мазков.

6, Определение понятий:

Полиморфизм микробов - неоднородность, гетерогенность особей,входящих

в популяцию, проявление внутривидовой популяционной изменчивости.

Различия между входящими в популяцию варами, клонами могут выражаться в размерах, форме клеток, питательных потребностях, характере роста на питательных средах, чувствительности к физическим, химическим и биологическим факторам, степени патогенности.

В понятие «морфологические свойства» входит форма микробной клетки, её величина, наличие или отсутствие спор, капсул, жгутиков, характер расположения клеток в мазке и тинкториальные свойства микробов, т.е. их отношение к красителям.Подвид и варианты:

морфовары (отличие по морфологии)
резистенсвары (отличие по устойчивости к антибиотикам)
серовары (отличие по антигенам)
фаговары (отличие по чувствительности к бактериофагам, т.е. вирусам
бактерий)
биовары (отличие по биологическим свойствам)

II Основные понятия

«Вид» - это совокупность микроорганизмов, имеющих единые происхождение и генотип, сходных по своим биологическим признакам и обладающих наследственно закрепленной способностью вызывать в стандартных условиях качественно определенные процессы.

«Штаммами» называют различные микробные культуры одного и того же вида, выделенные из различных источников, или даже из одного источника, но в разное время.

«Клон» - это культура микробов, выращенная из единственной микробной клетки.

«Чистая культура» - это популяция микробов, состоящая из особей одного вида.

III Основные формы бактерий:

1. Палочковидная (палочки)

2. Шаровидная (кокковидная, кокки)

3. Спиралевидная (извитая)

4. Ветвящаяся (нитевидная)

Палочковидные формы в зависимости от спорообразования подразделяются на:

- бактерии - палочки, не образующие споры (энтеробактерии).

бациллы - палочки, образующие споры в аэробных условиях (бациллы
сибирской язвы)
клостридии —палочки, образующие споры в анаэробных условиях
(клостридии столбняка, клостридии ботулизма)
IV Структура бактериальной клетки
Основными структурами бактериальной клетки являются: клеточная стенка, цитолазматическая мембрана, цитоплазма с включениями, ядерное вещество, называемое нуклеоидом.

Бактерии могут иметь и дополнительные структуры: капсулу или микрокапсулу, слизь, жгутики, пили, споры. Дополнительные структуры могут быть, а могут отсутствовать.

Морфология спирохет.

Спирохеты (speira —виток, изгиб, chaite —волосы) представляют собой спирально извитые подвижные микроорганизмы, объединённые в порядок Spirochaetales, семейство Spirochoutaceae, включающее 3 рода: Borrelia, Treponema, Zeptospira.

Спирохеты обладают признаками истинных бактерий и простейших. Первых они напоминают отсутствием компактного ядра. Со вторыми их сближает фибриллярность структуры цитоплазмы, наличие трипластоподобного образования, напоминающего оболочку клеток животных организмов. Спирохеты имеют форму длинных тонких спирально извитых клеток, длиной от 5 до 500 мм, шириной 0,2-0,75 мкм. В структурном отношении клетка спирохеты представляет собой цитоплазматический цилиндр, ограниченный ЦПМ и покрытый клеточной стенкой. У клетки имеется двигательный фибриллярный аппарат, в цитоплазме содержится нуклеоид, рибосомы, лизосомы и включения. Фибриллы —ошалош жгутиков бактерий, состоят из белка флагеллина. Их количество и величина неодинаковы у разных видов. Количество фибрилл в пучке у каждой клетки от 4 до 10 и более. Спор и капсул не образуют. Форма, количество завитков и характер движения у спирохет различны и являются поэтому важными дифференциальными признаками, позволяющими определить принадлежность к роду. Среди спирохет имеются сапрофиты (свободно живущие формы - в водоёмах), комменсалы -представители нормальной микрофлоры человека и паразитические формы, патогенные для человека: бледная трепонема - возбудитель сифилиса, лентоспиры - возбудитель лептоспироза, боррелии - возбудители возвратных тифов. Морфологию спирохет изучают в световом микроскопе в окрашенных препаратах по методу Романовского - Гимзы: сапрофиты окрашиваются в синий цвет, бледная трепонема и лептоспиры - в розовый (бледно розовыйО, а боррелии - в сине-фиолетовый.

Морфологию спирохет изучают в живом состоянии, путём микроскопии препаратов «висячая» или «раздавленная» капля в тёмном поле зрения (х 40, опустить конденсор вниз), дифференцируя различные виды спирохет по характеру движения, которое типично и стабильно для каждого вида, а именно: бледная трепонема обладает маятникообразным раскачиванием и плавным медленным сгибанием и разгибанием под углом; для боррелий типично толчкообразное или змеевидное движение; для лептоспир 1)быстрое прямолинейное движение, 2)движение по кругу и 3)вращение на месте. Этот метод (темнопольная микроскопия) является основным при диагностике заболеваний, вызванных патогенными спирохетами.

МОРФОЛОГИЯ РИККЕТСИЙ.

Риккетсии занимают промежуточное положение между бактериями и вирусами. Представляют собой грам- прокариоты, мелкие, размеры не превышают 1,5 мкм.

Как правило, они не способны расти на искусственных питательных средах, т.е. являются облигатными паразитами (в организме глистоногих). Отличаются выраженным полиморфизмом, образуя кокковидные, палочковидные, нитевидные формы. Располагаться могут одиночно, по двое, или в виде коротких цепочек.

Электронно-микроскопические исследования показали, что риккетсии не имеют жгутиков, не образуют спор и капсул. Исключение: у риккетсии Провачека отмечается наличие наружного слизеподобного слоя, сходного с бактериальной капсулой.

По своей ультраструктуре риккетсии сходны с грам- бактериями. Их клетки содержат клеточную стенку, ЦПМ, цитоплазму, в которой находятся нуклеоид, рибосомы и лизосомы.

Большинство риккетсии обитает в организме членистоногих. Некоторые виды патогенны для человека и животных и вызывают заболевания, называемые риккетсиозами (например, риккетсии Провачека вызывают сыпной тиф, риккетсии конозии - марсельскую лихорадку и т.д.) Морфологию риккетсии изучают в световом микроскопе в препаратах, окрашенных по методу Романовского - Гимзе по способу Здродовского или Хименеса, а также в фазово-контрастном микроскопе.

МОРФОЛОГИЯ ХЛАМИДИИ.

Хламидии или гальпровии относятся к облигатным внутриклеточным кокковидным грам- бактериям. Геном хламидии содержит в 4 раза меньше генетической информации, чем геном кишечной палочки. Хламидии размножаются только в живых клетках: их рассматривают как энергетических паразитов. По - видимому, у хламидии отсутствует система регенерации АТФ. Вне клеток (хозяина) хламидии имеют сферическую форму (О,3мкм), являясь элементарными тельцами. Внутри клеток они превращаются в делящиеся ретикулярные тельца, образуются их скопления - включения. Подобно бактериям хламидии имеют клеточную стенку с пептидоглюканами, рибосомы, РНК и ДНК, большое количество ферментов (ферментируют глюкозу с образованием СО2), нуклеоид.

Размножаются они как и бактерии путём поперечного деления. Новобразованные мелкие частицы могут выходить из клетки хозяина и инфицировать новые клетки. Цикл развития занимает 24-48 часов.

Хламидии, подобно риккетсиям, обладают свойством особым образом воспринимать окраску; Эта способность меняется на разных стадиях развития. Одиночные зрелые частицы («элементарные тельца») по Романовскому-Гимзе окрашиваются в пурпурный цвет, который хорошо контрастирует с синим цветом цитоплазмы клеток хозяина. Крупные неинфекционные тельца (первоначальные тельца) окрашиваются по Романовскому - Гимзе в синий цвет. Окраска по Граму даёт отрицательные или вариабельные результаты, поэтому данный метод не имеет ценности при идентификации возбудителей. У человека хламидии вызывают трахому, орнитоз и др.

МОРФОЛОГИЯ МИКОПЛАЗМ.

Микоплазмы отнесены в царство Procaryotes, класс Mollicutes (мягкокожие), пор. Mycoplasmatales, семейство Mycoplasmataceae, объединяющее 2 рода l)Mycoplasma (35 видов) и 2)Ureaplasma urealyficum и семейство Acholeplasmataceae и род Achooleplasma (5 видов).

Микоплазмы имеют строение прокариотов, но у них отсутствует клеточная стенка. Это - мелкие бактерии, окружённые цитоплазматической мембраной. Этим объясняется их полиморфизм. Из-за отсутствия клеточной стенки микоплазмы осмотически чувствительны и имеют разнообразную форму: кокковидную, нитевидную, колбовидную, гранул в виде крошечных кокков и элементарных телец, крупных шаров, колец, палочек, ветвящиеся или мицелиапьные формы и др. Эти формы видны при фазово-контрастной микроскопии чистых культур микоплазм. Размеры микоплазм варьируют от 125-250нм у гранулярных форм до 0,4-150мкм у нитевидных структур. Жгутиков, капсул, спор не образуют. По Граму окрашиваются отрицательно. В световом микроскопе обнаруживаются лишь самые большие формы микоплазм. В живом состоянии их изучают в тёмном поле и фазово-контрастном микроскопе, ультраструктурные элементы выявляют при помощи электронной микроскопии. Патогенные микоплазмы вызывают хронические инфекции. M.pneumoniae вызывают у человека заболевания по типу острой респираторной инфекции. Микоплазмы вызывают заболевания и у животных, и у растений. Достаточно широко распространены и непатогенные микоплазмы (в почве, в воде, на гниющих субстратах).

МОРФОЛОГИЯ АКТИНОМИЦЕТ.

Актиномицеты - это ветвящиеся грам+ бактерии. Актиномицеты (actis - луч, mykes - гриб) - «лучистые грибы» - это многочисленная группа микробов, включённых в порядок Actinomycefales, включающий 3 семейства: Actinomycetaceae, Strepfomycefaceae, Nocardiaceae. Антиномицеты имеют вид палочек, небольших разветвлённых нитей (ceм. Actinomycefaceae) или длинных тонких несептированных ветвящихся гиф (ceм.Streptomycefaceae). Клетки актиномицет имеют те же структурные элементы, что и бактерии: клеточную стенку, ЦПМ, нуклеоид, рибосомы, мезосомы, внутриклеточные включения. Некоторые актиномицеты образуют микрокапсулу; жгутиков не имеют, истинных спор не образуют.

На концах некоторых актиномицетов образуются одна или несколько экзоспор, которые являются органами плодоношения. Спороносцы актиномицетов прямые, волнистые и спиральные; споры крупные овальные и цилиндрические с гладкой волосистой, бородавчатой или шиловидной поверхностью. Актиномицеты, как и грибы, образуют мицелий —нитевидные переплетающиеся клетки (гифы). Они формируют субстратный лицелий, образующийся в результате врастания мицелия в питательную среду, и воздушный, растущий на поверхности среды. Спороносцы располагаются на концах гифов. Гифы актиномицет могут распадаться на палочки и кокки. Размеры актиномицет колеблются от 5,0- 7,0 до 100 мкм и более в длину и 0,5-2 мкм в ширину. Легко окрашиваются многими анилиновыми красителями грам+.

Размножаются простым поперечным делением, путём прорастания гиф и спор, почкованием.

Роль актиномицет. В почве они участвуют в разложении сложных веществ (клетчатки, неорганических полимеров). Стрептомицеты продуцируют антибиотики. Ряд видов обитает в ротовой полости, дыхательных путях, кишечнике и на коже человека. Они вызывают образование зубного налёта, зубного камня, но и играют роль фактора антиинфекционной защиты, так как являются антагонистами бактерий, микоплазм и грибов. Патогенные актиномицеты вызывают у человека актиномикоз и нокардиоз.

МОРФОЛОГИЯ ГРИБОВ.

В 1854г. Р.Вирхов впервые назвал грибковые заболевания людей и животных микозами - (mykes - гриб, logos - наука) - микология. Основоположником медицинской микологии в России является Н.В.Сорокин.

Систематика и классификация. Грибы отнесены к растительным гетеротрофным организмам - эукариотам, лишённым хлорофилла. Тип грибов (Fungi s Mycetes) насчитывает свыше 100 000 тысяч видов, объединённых более чем в 20 классов, которые в свою очередь подразделяются на подклассы, порядки, семейства, роды, виды, штаммы. Не более 100 видов могут вызывать заболевания у животных и человека. Среди грибов встречаются сапрофиты, паразиты и факультативные паразиты растение, животных и человека.

Морфология.

Форма клеток у молодых культур может быть круглая, яйцевидная или удлинённая; у зрелых клеток - грушевидная, булавовидная, веретенообразная, амёбовидная.

По строению грибы сходны с водорослями: они обладают дифференцированным ядром (одним или несколькими), клеточной стенкой, ЦПМ. Цитоплазма у молодых культур гомогенная, у зрелых - зернистая; в ней находятся митохондрии, аппарат Гольджи, вакуоли, различные включения (гликоген, волютин, липиды, пигменты, кристаллы органических солей). Основным структурным компонентом клеток грибов является мицелий, состоящий из разветвлённых бесцветных нитей (гиф) 1-10 мкм в диаметре и 4 - 70 мкм длиной. У одних видов он состоит из нерасчленённой клетки (Мисочголовчатая плесень), у других (высших грибов) он многоклеточный; у дрожжеподобных грибов (Candida) имеется псевдомицелий.

У низших грибов от мицелия отходит спорангиеносец, на конце которого находится спорангий, в котором внутри созревают эндогенные споры. У высших грибов от мицелия отходит конидиеносец, на конце которого расположены конидии - экзогенные споры.

Грибы размножаются делением, прорастанием, почкованием, спорообразованием.

Микроскопия. Чаще грибы микроскопируют в интактном состоянии. Жидкие патологические материалы предварительно центрифугируют, из осадка делают препараты и микроскопируют.

Волосы, чешуйки кожи погружают на 15-20 минут в каплю 10-30% едкой щёлочи (для просветления) и изучают при малом увеличении. Изредка делают мазки по Романовскому - Гимзе. Для выявления дрожжеподобных грибов мазки окрашивают анилиновыми красителями и по Граму (Candida грам+ овальные ветвящиеся клетки). Для дифференциации используют метод Циля -Нильсена, позволяющий обнаруживать в истинных дрожжах ярко красные споры, которых нет у Candida.

8. Микроскопический метод.

Микроскопический метод - это приготовление мазков из нативного материала или бактериальных культур, окраска их тем или иным способом и изучение при помощи оптических приборов - микроскопов - морфологических и тинкториальных свойств микробов.

Этот метод имеет большое значение при проведении бактериологической диагностики инфекционных заболеваний, т.к. позволяет дать предварительный положительный ответ о наличии микроорганизмов в исследуемом материале. А в ряде случаев он является ведущим (или основным и даже единственным) методом диагностики заболеваний, например, при острой гонорее, первичном сифилисе, пептослизорах, возвратных тифах и др. инфекци

Принципы классификации и характеристика отдельных групп микроорганизмов. Классификация бактерий и их ультраструктура