ГАМЕТОЦИДЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В СЕЛЕКЦИИ
Страница 9
Первые опыты с применением этрела в качестве гаметоцида для мягкой пшеницы были выполнены в 1961 г. К. В. Porter и A. F. Weise [116]. Предварительные эксперименты в вегетационных сосудах с сортами мягкой яровой пшеницы Marled и Thatcher дали обнадеживающие результаты. При обработке растений в фазы кущения, выхода в трубку и колошения растворами в концентрации 100, 250, 500, 750, 1000, 2000 и 2500 мг/кг из расчета 30 мл на сосуд с тремя растениями было установлено, что этрел, начиная с дозы 750 мг/кг, индуцировал 100%-ную стерильность у сорта Marfed. В этих
29
опытах исследователи впервые столкнулись с проблемой сортовой специфичности ответной реакции на обработку гамето-цидом.
'Степень стерильности при тех же дозах этрела у сорта Thatcher была значительно ниже, чем у Marfed, так как Thatcher был менее чувствителен к 0'бработке препаратом. В полевых условиях опыты проводили с сортом мягкой озимой пшеницы Nugaines. Обработку этрелом осуществляли в те же фазы концентрациями 500, 1000, 1500, 2000 и 3000 мг/кг. Опытные и контрольные варианты размещали рядом с сортами-опылителями, цветущими в разные сроки. Полная мужская стерильность была отмечена у растений пшеницы, обработанных растворами этрела в концентрации 1500, 2000, 3000 мг/кг. Максимальная стерилизация достигалась при нанесении на растения растворов этрела повышенной концентрации — 2000 и 3000 мг/кг в конце фазы выхода в трубку. При обработке в период колошения эффективность препарата снижалась. В опытах сохранилась высокая степень женской фертильности. Стерильные растения по морфологическим признакам были сходны с растениями пшеницы, обладающими UjMC. Применяемые концентрации вызывали укорачивание междоузлии и анормальное колошение отдельных растений [116].
Дальнейшие исследования были направлены на поиск эффективного сочетания оптимальных доз, концентраций и сроков обработки этрелом зерновых. Так, в экспериментах по 'ян-дуцированию мужской стерильности у растений мягкой пшеницы, проведенных в условиях вегетационного домика и в поле, раствор этрела в дозах 500, 1000, 2000 и 3000 мг/кг наносили в начальной фазе выхода в трубку и в конце ее. Наиболее эффективными в данных условиях были дозы этрела 1000 и 2000 мг/кг. Несмотря на нежелательные явления (усиленное кущение, замедленное колошение, торможение роста и развития, морфологические анормальности, приводившие в ряде случаев к гибели растений, и, как правило, к снижению урожайности), Р. L. Rowelil и D. G. Miller [122] считают, что надежды на этрел как на вещество, селективно вызывающее мужскую стерильность, довольно обоснованны и имеют практические возможности, которые лимитируются лишь разработкой конкретных методов обработки.
J. Law и N. С. Stoskopf [95] применяли этрел в полевых условиях в различные фазы морфогенеза ярового ячменя. Авторы пришли к выводу, что в условиях Канады лучшим периодом для обработки растений гаметоцидом является середина фазы выхода в трубку (фенологически — период появления предпоследнего листа) при одноразовом внесении до-
3J
зы 1,68 кг/га, которая давала приемлемый уровень мужской стерильности и не вызывала редукции женской фертильности. Этрел у ярового ячменя не проявлял гаметоцидного воздействия на яйцеклетку и являлся более потенциальным стерилизатором, чем другие применяемые с этой целью вещества, при условии его правильной комбинации с антиретардантны-ми компонентами.
При изучении оптимальных доз этрела (между 1000 и 2000 мг/кг) и времени его применения на пшенице (сорт Sirius) была поставлена цель — не только получить полную мужскую стерильность, но и устранить его побочное действие [80]. На основе предыдущих исследований было рекомендовано применение этрела до начала мейоза в материнских клетках пыльцы, когда достигалась наибольшая степень индукции мужской стерильности у пшеницы [47]. Нанесение этрела после мейоза вызывало нежелательные явления, приводящие к уменьшению количества колосков в колосе, которое сопровождалось определенной степенью стерильности макрота'мет (в зависимости от дозы препарата). Концентрация этрела 2000 мг/кг, вызывающая стерильность пыльцы, может также приводить к частичной или полной задержке колосьев во влагалищах листьев в результате сокращения соломины верхнего междоузлия. Наряду с этим, этрел стимулирует развитие, побочных стеблей, пыльцевые мешки которых часто находятся за пределами фазы применения этрела и не совпадают с премейотической фазой археспориальной ткани главного колоса.
Подобные затруднения практического характера возникают в любом случае при использовании различных гаметоци-дов. '"Определенную степень стерильности можно химически индуцировать почти на всех этапах развития растений, за исключением тех, когда уже сформировались зерна. Применение гаметоцкдов на ранних этапах развития растений не только индуцирует мужскую, а чаще общую стерильность, но и вызывает патологические формативные эффекты в растительных тканях. В зависимости от того, на каком этапе произошло «включение сигнала» механизмов мужской стерильности, можно получить различные типы мужской стерильности, которые классифицировали на 4 группы [64].
К первой группе относится стерильность, полученная за счет блокирования питания в результате прекращения развития и нормального течения процессов мейоза во внешне нормальных материнских клетках пыльцы, что приводит к образованию в открытых цветках пыльников, содержащих монады или диады. Ко второй группе относится стерильность, при которой отмечена дезорганизация процессов в материнских
31
клетках пыльцы в течение I и II мейотических профаз, что вызывает иррегуляцию при расхождения клеток в процессе двух мейотических делений. В материнских клетках в данном случае на стадии тетрад образуется изолированная группа клеток (более четырех), и микроспоры прекращают рост после ранней стадии развития экзины. Третья группа стерильности характеризуется анормально маленькой пыльцой с очень тонкой экзиной. К четвертой группе относится тип мужской стерильности, обусловливающий формирование нормальной пыльцы, но без терминальной поры.
При испытании веществ на гаметоцидную активность и поиске оптимального сочетания доз, концентраций и сроков их нанесения необходим цитологический контроль за микро-и макроспорогенезом.
Для каждой культуры существует критический период, при котором применение препарата обеспечивает наибольший эффект мужской гаметоцидной реакции. Согласно полученным данным, стадия мейоза микроспорогенеза наиболее критическая для применения этрела на зерновых, обеспечивающая максимум индукции мужской стерильности. Этот период у пшеницы приходится на конъюгацию хромосом в течение мейоза и формирование поры пыльцевого зерна [47, 48]. Однако очень важным периодом для индукций мужской стерильности является, по-видимому, и премейотическая фаза [94, 98].
В опытах с сортами озимой пшеницы Безостая I .и Nugai-nes цитологически контролировали изменения в микроспоро-генезе в зависимости от сроков нанесения этрела. Отмечено, что наибольшая эффективность .индукции мужской стерильности достигалась при обработке растений в фазе двух- и трехъядерной пыльцы [30]. 'Под влиянием этрела уже на стадии двухъядерной пыльцы наблюдались аномалии в развитии вегетативного ядра, контролирующего трофические функции при формировании пыльцевого зерна по отношению к спермиям [28]. Этим можно объяснить, что в пыльцевых зернах с возникающими под действием этрела митотически-ми нарушениями не накапливается крахмал [48]. Считают, что действие этрела связано с включением его в эпигенетические механизмы, действующие в период мейоза [30]. Это обусловливает нарушение в координации трофических функций вегетативного ядра, переключая его на митотическое деление, т. е. на клеточном уровне этрел действует не как ингибитор роста, а наоборот, стимулирует вторичное деление ядер, которые в норме никогда не делятся.
Точное определение критического периода воздействия га-метоцида имеет свои сложности, так как в литературе рекомендована широкая шкала доз при использовании одного и