<< Пред. стр. 35 (из 116) След. >>
1,65 х 0,464а = 99 - ------------ = 98,56%;
min ---
/ 3
1,65 х 0,464
а = 99 + ------------ = 99,44%.
max ---
/ 3
Полученные оценки а и а близки к границам
min max
_ "ДЕЛЬТА"х
доверительного интервала А +/- "ДЕЛЬТА"х = А +/- --------- =
---
/ m
0,97
= 99 +/- ----- = 99 +/- 0,56, что соответствует примечанию I.5.1.
---
/ 3
I.6. РАСЧЕТ И СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА
ПАРАМЕТРОВ ЛИНЕЙНОЙ ЗАВИСИМОСТИ
При использовании ряда химических и физико - химических
методов количественного анализа непосредственному измерению
подвергается некоторая величина у, которая является линейной
функцией искомой концентрации (количества) х определяемого
вещества или элемента. Иными словами, в основе таких методов
анализа лежит существование линейной зависимости:
у = bх + а, (I.6.1)
где у - измеряемая величина; x - концентрация (количество)
определяемого вещества или элемента; b - угловой коэффициент
линейной зависимости; a - свободный член линейной зависимости.
Для использования зависимости I.6.1 в аналитических целях,
т.е. для определения конкретной величины x по измеренному значению
у, необходимо заранее найти числовые значения констант Ь и а, т.е.
провести калибровку. Иногда константы функции (I.6.1) имеют тот
или иной физический смысл, и их значения должны оцениваться с
учетом соответствующего доверительного интервала. Если калибровка
проведена и значения констант а и Ь определены, величину х находят
по измеренному значению у ; i
i
1 а
х = --- у - ---. (I.6.2)
i b i b
При калибровке величину х рассматривают как аргумент, а
величину у - как функцию. Наличие линейной зависимости между х и у
не всегда является очевидным. По этой причине экспериментальные
данные, полученные при калибровке, в первую очередь используют для
оценки жесткости, т. е. степени неслучайности линейной связи между
х и у, и лишь затем определяют значения констант а и b и их
доверительные интервалы. В первом приближении судить о жесткости
линейной связи между переменными х и у можно по величине
коэффициента корреляции r, который вычисляют по уравнению:
m m m (I.6.3)
m SUM х у - SUM х SUM у
1 i i 1 i 1 i
r = ----------------------------------------------------------
------------------------------------------------
/Љ Ї Љ Ї m
/ Ј m 2 m 2 Ј Ј m 2 m 2 Ј
/ Јm SUM х - (SUM х ) Ј Јm SUM у - (SUM у ) Ј
/ Ј 1 i 1 i Ј Ј 1 i 1 i Ј
/ ђ ‰ ђ ‰
исходя из экспериментальных данных, представленных в табл. I.6.1.
Чем ближе ЈrЈ к единице, тем менее случайна наблюдаемая линейная
зависимость между переменными х и у. В аналитической химии в
большинстве случаев используют линейные зависимости с
коэффициентом корреляции ЈrЈ >= 0,98 и только при анализе следовых
количеств рассматривают линейные зависимости с коэффициентом
корреляции ЈrЈ >= 0,9. Применение уравнения I.6.2 оправдано только
при ЈrЈ >= 0,95.
Коэффициенты a и b и другие метрологические характеристики
зависимости I.6.1 рассчитывают с использованием метода наименьших
квадратов по экспериментально измеренным значениям переменной у
для заданных значений аргумента х. Пусть в результате эксперимента
найдены представленные в табл. I.6.1 пары значений аргумента х и
функции у.
Таблица I.6.1
Љ"""""""'""""""""'""""""""Ї
Ј i Ј x Ј у Ј
Ј Ј i Ј i Ј
""""""""•""""""""•""""""""¤
Ј 1 Ј х Ј у Ј
Ј Ј 1 Ј 1 Ј
""""""""•""""""""•""""""""¤
Ј 2 Ј х Ј у Ј
Ј Ј 2 Ј 2 Ј
""""""""•""""""""•""""""""¤
Ј ... Ј ... Ј ... Ј
""""""""•""""""""•""""""""¤
Ј m Ј х Ј у Ј
Ј Ј m Ј m Ј
ђ"""""""'""""""""'""""""""‰
Тогда:
m m m
m SUM х у - SUM х SUM у
1 i i 1 i 1 i
b = ---------------------------- (I.6.4)
m 2 m 2
m SUM х - (SUM х )
1 i 1 i
m m
SUM у - b SUM х
1 i 1 i
а = --------------------- ; (I.6.5)
m
f = m - 2. (1.6.6)
Если полученные значения коэффициентов a и b использовать для
вычисления значений у по заданным в табл. I.6.1 значениям
аргумента х согласно зависимости I.6.1, то вычисленные значения Y
обозначают через Y1, Y2, ... Yi, ... Yn. Разброс значений у
i
2
относительно значений Yi, характеризует величина дисперсии s0 ,
которую вычисляют по уравнению:
m 2 m 2 m m
SUM (у - Yi) SUM у - аSUM у - bSUM х у
2 1 i 1 i 1 i 1 i i
s0 = -------------- = ------------------------------- . (I.6.7)
f f
В свою очередь дисперсии констант b и a находят по уравнениям:
2
2 ms0
s = --------------------; (I.6.8)
b m 2 m 2
mSUM х - (SUM х )
1 i 1 i
2
s
2 b m 2
s = ---- SUM х . (1.6.9)
а m 1 i
Стандартные отклонения s , и s и величины "ДЕЛЬТА"b и "ДЕЛЬТА"
b а
a, необходимые для оценки доверительных интервалов констант,
рассчитывают по уравнениям:
----
/ 2
s = / s ; (I.6.10)
b / b
----
/ 2
s = / s ; (I.6.11)
а / а
"ДЕЛЬТА"b = t(P; F)s ; (I.6.12)
b
"ДЕЛЬТА"а = t(P; F)s . (I.6.13)
а
Уравнению I.6.1 с константами a и b обязательно удовлетворяет
_ _
точка с координатами х и у, называемая центром калибровочного
графика:
m
SUM х
_ 1 i
х = --------; (I.6.14)
m
m
SUM у
_ 1 i
у = -------. (I.6.15)
m
Наименьшие отклонения значений у от значений Yi наблюдаются
i
в окрестностях центра графика. Стандартные отклонения s и s
у x
величины у и х, рассчитанных соответственно по уравнениям I.6.1 и
I.6.2 исходя из известных значений х и у, определяются с учетом
удаления последних от координат центра графика:
--------------------------------
/ _ 2
/ 2Љ 1 m(x - x) Ї
s = / s Ј--- + ----------------------Ј ; (I.6.16)
y / 0ђ m m 2 m 2 ‰
/ mSUM х - (SUM х )
/ 1 i 1 i
------------------------------------------
/ Љ _ _ 2 Ї
/ Ј m(у - у) Ј
/ 2 Ј 1 1 j Ј
s = / s0 Ј--- + --- + ---------------------------Ј(I.6.17)
x / --- Ј n m 2Љ m 2 m 2 Ї Ј
/ 2 Ј j b Ј mSUM х - (SUM х ) Ј Ј
/ b ђ ђ 1 i 1 i ‰ ‰
_
где у - среднее значение; n - число вариант, использованных
j _ j
при определении у .
j
_ _ _
При х = х и у = у:
j -----
/ 2
/ s0
s = / ----- ;
у / m
(I.6.16а)
----------------
/ 2 Љ Ї
/ sa Ј 1 1 Ј
s = / --- Ј--- + --- Ј.
x / 2 Ј n m Ј
/ b Ј j Ј
/ ђ ‰
С учетом значений s и s могут быть найдены значения величин
у x
"ДЕЛЬТА"у и "ДЕЛЬТА"x .
"ДЕЛЬТА"у = s t(P; F); (I.6.18)
у
"ДЕЛЬТА"x = s t(P; F). (I.6.19)
x
Значения s и "ДЕЛЬТА"x, найденные при n = 1, являются
x j
характеристиками воспроизводимости аналитического метода, если х -
концентрация, а у - функция х.
Обычно результаты статистической обработки по методу
наименьших квадратов сводят в таблицу (табл. I.6.2).
Таблица I.6.2
Результаты статистической обработки экспериментальных
данных, полученных при изучении линейной зависимости
вида y = bх + а
Љ"'"'"'"'"'"""""""'""""""'""""""'""'""'"""""""'""""""'""""""""""""Ї
ЈfЈ_Ј_ЈbЈаЈt(P, f)Ј"ДЕЛЬ-Ј"ДЕЛЬ-Ј 2Јr Ј s Ј"ДЕЛЬ-Ј"ДЕЛЬТАх"100Ј
Ј ЈxЈуЈ Ј Ј при ЈТА"b ЈТА"a Јs0Ј Ј x ЈТА"x Ј------------Ј
Ј Ј Ј Ј Ј ЈР = 95%Ј Ј Ј Ј Јпри Ј Ј _ Ј
Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Јn = 1,Ј Ј x Ј
Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј j _ Ј Ј Ј
Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ју = у Ј Ј Ј
Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј Ј j Ј Ј Ј
""•"•"•"•"•"""""""•""""""•""""""•""•""•"""""""•""""""•""""""""""""¤
Ј1Ј2Ј3Ј4Ј5Ј 6 Ј 7 Ј 8 Ј 9Ј10Ј 11 Ј 12 Ј 13 Ј
ђ"'"'"'"'"'"""""""'""""""'""""""'""'""'"""""""'""""""'""""""""""""‰
Примечание I.6.1. Если целью экспериментальной работы являлось
определение констант b и a, графы 11, 12 и 13 табл. I.6.2 не
заполняются.
Примечание I.6.2. Если у = Ьlg x + a, вычисления, описанные в
разделе I.6, выполняют с учетом примечаний I.1.2 и I.2.2.
2
Примечание I.6.3. Сравнение дисперсий s0, полученных в разных
условиях для двух линейных зависимостей, может быть проведено, как
указано в разделе I.3 (см. выражения I.3.4, I.3.5 и I.3.5а).
II. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ПРЕПАРАТОВ БИОЛОГИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
II.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА
БИОЛОГИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Во многих случаях установление свойств препаратов при помощи
физических и химических анализов достаточно для полной
характеристики свойств этих препаратов, включая и их биологическую
активность. Однако физические и химические свойства препарата не
всегда могут быть стандартизованы. Нередки случаи, когда связь
между этими свойствами препарата и его биологической активностью
установлена недостаточно определенно и однозначно. В подобных
случаях биологическая активность фармакологического агента может
быть определена только при помощи непосредственного биологического
исследования.
Чаще всего показатель, характеризующий биологическую
активность препарата, учитывается в количественной форме: