Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе
Государственный Аграрный Университет Молдовы
На правах рукописи
ЖOCAH Николай Степанович
УДК 619:619. 98-092:636.2-053.2
СОСТОЯНИЕ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ
16.00.03 тАУ ветеринарная микробиология и вирусология
Диссертация
на соискание ученной степени доктора ветеринарных наук
Научный консультант тАУ Скутару Иван Гаврилович, доктор-хабилитат ветеринарных наук, профессор
Кишинев 1998
Содержание:
Список условных сокращенийтАжтАжтАжтАжтАжтАжтАжтАжтАжтАжтАж6
ВВЕДЕНИЕ.................................... 7
РАЗДЕЛ I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ................... 17
1.1. Краткие сведения о колибактериозе телят...... 17
1.2. Специфическая иммунологическая реактивность телят в постнатальный период.................... 43
1.3. Неспецифическая иммунологическая реактивность новорожденных телят..................... 53
1.4. Получение и применение лактоглобулинов..... 57
заключение................................ 64
РАЗДЕЛ 2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 66
2.1. Материалы и методы исследований........... 66
2.2. Изучение специфической иммунологической реактивности телят в постнатальный период... 89
2.2.1. Уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят до приема молозива и через 24ч после рождения и взаимосвязь между концентрацией иммуноглобулинов и проявлением синдрома нарушения пищеварения. 90
2.2.2. Количественная характеристика абсорбции колостральных иммуноглобулинов новорожденными телятами. ............................ 94
2.2.3. Уровень колостральных иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят через 6, 24 и 48 ч после рождения........................... 100
2.2.4. Количественное определение колостральных иммуноглобулинов в сыворотке крови и в фецес неонатальных телят.................... 102
2.2.5. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови и секрете молочной железы коров........... 103
2.2.6. Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови коров и новорожденных телят............ 105
2.2.7. Уровень антител против О-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве, молоке и сыворотке крови новорожденных телят.............. 110
2.2.8. Уровень антител против К-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве, молоке и в сыворотке крови новорожденных телят.............. 120
2.2.9. Протективный механизм молозива при колибактериозе новорожденных телят................... 131
2.2.10. Факторы, влияющие на выживание новорожденных телят.............................. 134
2.2.11. Клиническая оценка эффективности вакцинации коров для профилактики колибактериоза телят..... 137
ВЫВОДЫ.................................... 145
РАЗДЕЛ 3 ИЗУЧЕНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛяТ...................................... 147
3.1. Биохимический анализ крови новорожденных телят. 147
3.2. Коррекция кислотно-основного баланса при диареи неонатальных телят..................... 154
3.3. Изменение фагоцитарныхных показателей у новорожденных телят в зависимости от клинического статуса.............................. 158
3.4.Бактерицидная активность сыворотки крови новорожденных телят.................... 171
3.5. Комплементарная активность сыворотки крови новорожденных телят.................... 178
3.6. Лизоцимная активность сыворотки крови..... 184
3.7. Пропердиновая активность сыворотки крови... 189
ВЫВОДЫ.................................... 193
РАЗДЕЛ 4 ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ.. 194
4.1. Эффективность применения колостральной сыворотки и лактоглобулина для коррекции иммунодефицита неонатальных телят..................... 194
4.2. Эффективность лактоглобулина и ретинола применяемых с целью коррекции иммунодефицита новорожденных телят................................ 198
4.3. Применение хлорпромазина и Т-активина для лечения телят, больных колибактериозом............ 203
ВЫВОДЫ.................................... 209
5. Обсуждение результатов исследований... 210
6. ВЫВОДЫ.................................. 222
7. РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ.............. 228
СПИСОК условных сокращений
агт тАУ агглютинационный тест
ант тАУ антиглобулиновый тест
атф тАУ аденозинтрифосфат
днк тАУ дезоксирибонуклеиновая кислота
мпа тАУ мясо-пептонный агар
мпб тАУ мясо-пептонный бульон
мппб тАУ мясо-пептонный печоночный бульон
ра тАУ реакция аглютинации
рнк тАУ рибонуклеиновая кислота
рн тАУ отрицательный логарифм концентрации водородных ионов
сда тАУ синдром дефицита антител
tl тАУ термолабильная фракция E. coli
ts тАУ термостабильная фракция E. coli
фэк-м тАУ фотоэлектрокаллориметр
цамф тАУ циклический 3тАЩ5тАЩ - аденозинмонофосфат
ВВЕДЕНИЕ
Успешное развитие животноводства во многом зависит от направленного выращивания молодняка, сочетающего высокую продуктивность с устойчивостью организма к заболеваниям.
Результаты многочисленных исследований состояния естественной резистентности организма сельскохозяйственных животных свидетельствует о том, что защитные силы являются динамичным показателем, и определяется как генетическими особенностями организма, так и воздействием различных факторов окружающей среды. Это обстоятельство позволяет направленно влиять на формирование и проявление защитных сил организма. Обеспечение
животным б
лагоприятных условий
содержания, максимально отвечающих биол
огическим особенностям о
рганизма, сложивш
имся в процессе эволюционного развития, способ
ству
ет бо
лее быстрому
формированию и лучшему проявл
ению его защитных сил. Вместе с тем, небл
агоприятное воздействие окружаю
щей среды приводит к ослаблению устой
чивости организма, защитные силы его проявл
яются недостаточно, что
усил
ива
ет опасность возникновения и распространения
инфекционных заболеваний. Следова
тел
ьно, инфекционные болезни
мо
гут возникнуть тол
ько в результате нарушения
нормал
ьной
реактивности, осл
абл
ения защитных свой
ств организма.
На фоне наруш
ения нормальной
реактивности и ослабления защитных свой
ств организма возникают массовые желудочно-ки
шечные заболевания новорожденных животных, особ
енно телят. Среди них, колибактериоз
телят относится к числу наиболее широко распространенных инфекционных бол
езн
ей
мол
одняка
и регистрируется во всех развитых странах мира, в том числ
е в хозяй
ствах Республ
ики Молдова.
Вследствие этого, актуальность изучения данного заб
олевания стал
а не мень
ше
й,
а наоборот
возросла. Это связано с резистентностью энтеротоксических
штаммов
Е. coliк
больш
инству доступных химиотерапевтических
средств. Данная резистентность
имеет внехромосомаль
ный
характер, она детерминиру
ется плазмидами
(R) и в связи с этим постепенно охватывает все большее
число
штаммов
энтеротоксических
и опред
еляется, как Влзаразная компл
ексная резистентность
к антибиотикамВ». Кроме того, про
дуцируемые эшерихиями
экзо- эндо
- и энтеротоксин способны
воздействовать самостоятел
ьно, что затрудняет испол
ьзование средств специфической защиты и профил
актики. Очень сложное многогранное и далеко не изученное воздействие возбудителя на иммунную систему организма хозяина приводящее к кр
айне низкой его сопротивл
яемости.
Биологическая актив
ность энтеротоксинов
проявляется в виде наруш
ения равновесия между процессами секреции электролитов в киш
ечнике. Колонизация энтеротоксических
штаммов Е. coli
посредством специфических фимбрий
в энтероциты,
дает возможность проникновения в них мол
екул энтеротоксинов, которые нарушают состояние равновесия между
объемами электролитов, перемещаемых из кровеносных сосудов в кишечник и в обратном направлении,
это же равновесие является результатом роста секреции жидкостей эпител
ием кишечных крипт и торможения их резорбции кл
етками эпителия кишечных ворсинок.
Таким о
бразом
, вследствие продуцирования
кишечной палочкой (Е. coli)
энтеротоксина
происходит стимул
яция аденилаткиназы
энтероцитов,
что вызывает трансформацию АТФ
в циклический 3тАЩ,5тАЩ-аденозинмонофосфат
(АМФ).
Одновременно изменяется функция энтероцитов,
которые вместо абсорбции питательных веществ, элиминируют свободную воду и минеральные вещества из кл
етки в киш
ечник, что приводит к резкому обезвоживанию и деструктивным изменениям ворсинок эпителия [E. Salajka, 1980]. Следовател
ьно, колонизация слизистой киш
ечника патогенными Е. coli имеет
основное значение для развития бол
езни. Смертельные исходы в ходе острой формы колибактериоза
у новорожденных телят являются следствием существенных нарушений электролитного равн
овесия и дегидратации.
Актуальность темы
. Снижение заболеваемости
и пред
упреждение гибели народившегося молодняка является од
ной из гл
авн
ых зад
ач, стоящих перед
ветеринарной наукой и практикой.
Од
ной из гл
авных п
ри
чи
н, тормозящих полное сохранение нарождающегося молодняка
тАФ массовые желудочно-кишечные
забол
евания новорожденных ж
ивотных, особенно телят.
Эти
забол
евания имеют ш
ирокое распространение, наносят значительный экономический ущерб и вызывают большой отход телят, который составляет в странах мира от 3,1 до 31,0 %, а в бывш
ем СССР средний отход среди заболевших телят за ряд лет составил 18-21 % [Г. В. Гнатенко, 1968; Л. К. Волынец, 1975; А. В. Драгомир, Е. А. Драгомир, A.Ф. Карышева, Ф. В. Спатарь, 1985; А. А. Гутковский, 1989; Ю. С. Кабанков, С. Ф. Армашу, 1991].
Среди заболеваний новорожденных телят колибактериоз
занимает одно из ведущих мест. Он относится к числ
у острых заболеваний, чаще всего протекающее с признаками диареи, интоксикации, септицемии, расстройства сердечно-сосудистой и центральной нервной
системы. В возникновении, развитии и исходе заболевания реактивность организм
а играет первостепенную роль [С. Н. Преображенский, Н. И. Блинов, Н. В. Ершова, Г. В. Вышинский, 1974; И. М. Архангельский, 1976; В. С. Бузлама, С. М. Сулейманов, В. Н. Долгополов, Н. Н. Коновалов, М. Н. Рецкий, И. С. Толкачев, 1978; П. А. Емельяненко, 1979; Э. С. Коган, 1981; В. Я. Мозгис, 1982; В. М. Асламов, 1983; М. А. Костына, 1984; R. Morar, 1985; А. Н. Голиков, 1989; И. М. Карпуть, А. Г. Ульянов, 1990; Е. А. Маринин, Т. Т. Ворошилова, 1993; П. П. Игнатьев, Г. Ч. Бондаренко, 1994; T. E. Besser, C. C. Gay, 1994; A. S. Sheikh, P. S. Bradford, S. C. James, B. Patricia, B. F. Thomas, H. Richard, D. Gregore, D. R. Lin, W. Bert, 1995; Д. Н. Масюк, 1997].
Защитные силы животных являются основными показателями, обеспечивающими устойчивость организма новорожденных телят к факторам внешней среды и их тестирование позволяет определять иммунный статус.
Н
еблаг
оп
рия
тное возд
ей
ствие окружающе
й среды
пр
ив
оди
т к ослаблени
ю у
стой
чивости
организма
и усиливает
опасность возни
кн
овения и распространения
различных
заболеваний,
в том
числе
и
нфекци
онных. В связи с эт
им акад
еми
к А. А. Богомол
ов отмечал,
что инфекцио
нные боле
зн
и могут
возникну
ть тол
ько в р
езул
ьтате наруш
ений нормал
ьной
реа
ктивности
, осл
абления
защи
тных свой
ств организма [
С. И. Плященко, В. Т. Сидоров, А. Ф. Трофимов, 1990].
Несмо
тря на то, что в профила
ктике коли
бактериоз
а тел
ят до
сти
гн
ут
ы опр
ед
еленные у
спехи, однако эта
проблема
еще д
алеко от своего
полного решен
ия
. Лекарственные препараты, использу
ем
ые с это
й целью,
не вызывают коррекцию
иммунного статуса. Кроме то
го, реализация су
ществую
щих способов
профил
актики колибактериоза
телят затру
днена из‑з
а отсутствия экспресс-индикаци
и К-антител
в колострально
й сыворотке
коров.
И
зу
чение иммунологическо
й реактивности
организма новорожденных телят, таким
об
разо
м, приобретает
актуальное значени
е дл
я понимания
патогенез
а заболевания,
для рационально
й патогенетической
терапии.
Связь работы с научными программами.Тема диссертационной работы была частью проблемы ветеринарной медицины Республики Молдова ВлРазработка методов и средств профилактики и борьбы с болезнями животныхВ».
Цел
ь работы.
Цель работы состоит в экспериментальном и теоретическом обосновании неспецифической и специфической реактивности новорожденных телят при колибактериозе, разработке иммунологически обоснованных рациональных способов коррекции иммунного статуса и ингибирования циклического аденозинмонофосфата (сАМР) посредством Вланти-секреторного фактораВ».
Для реализации данной цели мы поставили следующие задачи
:
1. Определить уровень антител против О- и К-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве, молоке и в сыворотке крови новорожденных телят.
2. Изучить количественную характеристику абсорбции колостральных иммуноглобулинов классов G, М и А новорожденными телятами.
3. Выявить роль кислотно-основного баланса в течение инфекционного процесса при колибактериоза телят.
4. Установить величину взаимосвязи между показателями неспецифической реактивности; (фагоцитарная реакция, бактерицидная, лизоцимная, комплементарная и пропердиновая активность) у здоровых, больных и павших новорожденных телят.
5. Разработать способы коррекции иммунного статуса новорожденных телят и ингибирования циклического аденозинмонофосфата (сАМР) посредством Влантисекреторного фактораВ».
Научная новизна полученных результатов.
Новизна работы заключается в том, что впервые к изучению заболевания колибактериоза телят проявлен новый, комплексный подход. В результате комплексно проведенных исследований изучена специфическая и неспецифическая реактивность организма новорожденных телят.
Впервые изучен уровень антител против К-антигенов в нормальном коровьем молозиве, молоке и в сыворотке крови новорожденных телят.
Доказано, что клинический статус новорожденных телят находится в прямой зависимости от сывороточной концентрации иммунных глобулинов и их катаболической эффективности, увеличение уровня иммуноглобулинов М и А в сыворотке крови клинически здоровых животных в среднем в 5,7 и 3,4 раза, по сравнению с павшими указывает на их защитную функцию. Выявлено нарушение кислотно-щелочного равновесия при диареи неонатальных телят. Доказано, что сопутствующими ацидозу были отклонения в уровнях сывороточных хлоридов натрия, кальция и калия. Применение электролитного раствора корректировало указанные аномалии.
Установлена взаимосвязь между фагоцитарными показателями и бактерицидной активностью сыворотки крови, между фагоцитарной активностью и уровнем пропердина, между уровнем пропердина и лизоцимной активностью, между уровнем комплемента и фагоцитарной активностью у здоровых, больных и павших телят.
Обоснованы и испытаны лекарственные препараты, корректирующие иммунный статус новорожденных телят и ингибирующие циклический аденозинмонофосфат (сАМР) посредством Вланти-секреторного фактораВ».
Практическая значимость полученных результатов. На основании результатов исследований определен уровень антител против О- и К-антигенов Е. coli. Изучена количественная характеристика абсорбции колостральных иммуноглобулинов новорожденными телятами.
Материалы дают информацию о содержании иммуноглобулинов G, M и А в сыворотке крови и в фекалиях телят больных колибактериозом, а также об экспресс методах для определения иммунного статуса новорожденных телят.
Для коррекции иммунного статуса испытан лактоглобулин совместно с ретинолом. Испытан хлорпромазин совместно с Т-активином для ингибирования циклического аденозинмонофосфата.
Результаты исследований позволяют дать теоретически обоснованные рекомендации по коррекции специфической реактивности организма новорожденных телят, для понимания патогенеза заболевания и для рациональной патогенетической терапии, так как в возникновении, развитии и исходе заболевания реактивность организма играет первостепенную роль.
Основные результаты исследований используются в учебной и научно-исследовательской работе и в практической деятельности ветеринарных специалистов хозяйств Республики Молдова.
Для ветеринарной наук и практики предложены:
I. Методические рекомендации по применению колостральной сыворотки и лактоглобулина для коррекции иммунодефицита неонатальных телят. Одобрены научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства и продовольствия Республики Молдова. Изданы: Молдагроинформреклама, Кишинев, 1992.
II. Методические рекомендации тАУ Экспресс-метод индикации антиген-агглютининов против К-антигена Е. coli в колостральной сыворотке коров и в сыворотке крови новорожденных телят. Одобрены Научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства и продовольствия республики Молдова, Кишинев, 1994.
Разработаны способы:
I. Коррекция иммунодефицита неонатальных телят. (Brevet de invenţie, n 345), Republica Moldova.
II. Лечение телят больных колибактериозом (Brevet de invenţie, nr. 409), Republica Moldova.
III. Результаты исследований включены в тексты лекций и реализуются на лабораторно-практических занятиях со студентами ветеринарного и зооинженерного факультетов Государственного аграрного университета Республики Молдова.
Личный вклад соискателя.Автором самостоятельно выполнен весь объем экспериментальных исследований. Биохимический анализ крови проводили на венгерской лабораторной установке ВлКонтифлоВ».
Апробация результатов диссертации. Результаты научных исследований доложены и одобрены на состоявшемся в октябре 1972 г. в г. Москве Пленуме отделения ветеринарии ВАСХНИЛ по проблеме лечения и профилактики болезней молодняка сельскохозяйственных животных; на научной конференции профессорско-преподавательского состава Одесского сельскохозяйственного института (Одесса, 1974); на научной конференции по вопросам повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в условиях Северного Казахстана (Целиноград, 1976), на Республиканской научной конференций профессорско-преподавательского состава и аспирантов Кишиневского сельскохозяйственного института им. М. В. Фрунзе (Кишинев 1977); на 3-х конференциях профессорско-преподавательского состава научно-исследовательской конференции Кишиневского сельскохозяйственного института (Кишинев, 1979, 1980, 1982); на Республиканской научно-производственной конференции (Кишинев, 1981); на Республиканской научно-практической конференции ВлТехнические проблемы продовольственной программыВ» (Кишинев, 1984); на Всесоюзной научно-производственной конференции ВлВопросы интенсификации и научно-обоснованного ветеринарного обслуживания промышленного животноводстваВ» (Кишинев, 1987); на заседаниях Ученого совета ветеринарного факультета Государственного аграрного университета Республики Молдова. (1988-1998 гг.).
Публикации.По материалам диссертации опубликовано 37 работ в трудах ВАСХНИЛ, межвузовских сборниках и республиканских изданиях, в том числе 2 учебника (учебные пособия), 1 монография, 29 научных статей, 2 патента, 1 рацпредложение, 2 методические рекомендации.
Стру
ктур
а и объем диссертации.
Дис
се
ртация
изложена на 229 страницах машинописного те
кста и сос
тоит из вве
дения, обз
ора литературы,
результатов собственных исследований,
обсужд
ения полученных результатов,
вывод
ов, рекомендаций производству, списка литературы
и приложения.
Работа содержит 88
таблиц и 11 рисунков. Список литературы вклю
чает 410 источников, в том числе 212 иностранных.
РАЗДЕЛ I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.
Крат
кие сведения
о колибактериозе телят
1.1.1. Истор
иче
ская сп
р
авка. Учение о рол
и в патологии новорожденных телят кишечных палочек
(
Bact. сoli
, позже названной Eschеri
chi
a coli,
1939), обнару
женных Обихом
[C. О. Jensen, 1897], а позже Эшерихом
[Th. Escherich, 1885] прошло д
лительн
ую
историю становления.
Морские свинки и кролики после заражения кишечной палочкой погибали через
несколько часов, а иногда через
2 дня, при наличии сильного поноса и повышенной температуры [Th. Escherich, 1885]. Болезнетворное действие микроба проявлялось как при интраперитонеальном
, так и при подкожном заражении.
Датский ученый C. O. Jensen, 1897 первый обратил внимание на кишечную палочку как на возбудителя поносов у новорожденных животных. Его исследования позволили предположить об анал
огич
ной причине диспепсических расстройств у детей.
По данным многочисленных ис
следователей среди массовых желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят значительный удельный вес занимают инфек
ционные заболевания, из которых наибольшее распространение имеет коли-инфекция
[
П. Алтухов, 1904; М. К. Апалев, 1908; Th. Smith, M. L. Orcutt, 1925; Ф. Гутира, И. Марек, Р. Маннингер, И. Мочи, 1961; Т. П. Руденко, 1963; О. С. Андреева, 1966; Д. Келмен, 1967; Е. П. Чиркова, 1968; Я. Е. Коляков, С. С. Гительсон, Л. С. Каврук, 1970; Л. Н. Головнев, 1970; S. Craven, 1970; C. C. Gaу, 1971; H. Feу, 1972; T. Gossling, K. A. Mckaу, 1974; H. W. Moon, 1974; S. D. Acres, C. J. Laing, O. M. Radostis, 1975; А. В. Голиков, А. С. Вовк, А. Т. Марчук, В. Т. Ширяева, 1976; J. Tyler, 1976; Л. К. Волынец, 1978; Г. Пашкявичус, 1978; Я. Е. Коляков, 1978; Ю. В. Алексеев, 1979; J. E. C. Bellamу, S. D. Acres, 1979; J. Hutchinoson, 1979; H. W. Smith, M. B. Huggins, 1979; E. Salajka, 1980; М. А. Сидоров, 1981; H. Feу, 1981; Дж. Х. Б. Рой, 1982; C. C. Gaу, S. M. Parish, T. C. McGuire, 1982; В. А. Аликаев, В. В. Матюшин, 1983; Г. В. Гнатенко, Л. Т. Тупица, 1984; М. А. Сидоров, 1984; В. А. Гушул, Л. А. Афанасьев, Т. П. Мантрова, 1984; M. E. Amstutz, 1985; J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985; В. Г. Зароза, 1985; И. И. Фельдман, 1985; Я. Антал, Р. Благо, Я. Булла, 1986; В. И. Девликамов, М. А. Сидоров, 1986; L. Okerman, 1987; M. M. Levine, 1987; К. С. Ливанов, 1988; Г. Л. Дворкин, 1989; З. М. Бедоева, 1990; В. Г. Зароза, 1991; В. А. Ушкалов, 1992; Г. К. Волков, В. Д. Баранников, 1997; ]
.
1.1.2. Воз
бу
д
итель
болезни. Изучение энтеропато
генной роли к
ишечной палочки для человека и животны
х начинаетс
я сра
зу
же после откры
тия ее Обихом
Цит. по Jensen C. O., (1897), позже Эшерихом
[Th. Escherich, 1885] и, особенно Иенс
еном [C. O. Jensen, 1897].
В 1897 году C. O. Jensen, 1897 отметил, что в органах и ки
шечнике тел
ят,
павших от кровавого пон
оса, находится
большое количес
тво микробов
подобных тем, которые были открыты Эшерихом. Иенсен
установил, что
достаточно новорожденному теленку дать вмес
те с мол
оком 5-
6 мл бульонной
культуры Е. coli,
выделенной
из трупов телят,
павших от поноса, чтобы вызвать смертельную болезнь.
Возможность эндогенного возникновения колибациллеза
у телят путем скармливания
им креолина, пиоктанина
и ф
ормалина, вызывавших у телят острый энтерит
и последующее проникновение Е. coli в общий кроваток экспериментально подтвердил C. O. Jensen, 1905. Из
органов
павших в этих случаях животных вы
делял
и бактерии кишечной палочки, способные вызвать забол
евание при пероральной
даче их здоровым теля
там без введения раздражающих веществ. На этом основании Иенсен счи
тал, что диз
ентерию, Влбелый
поносВ», может выз
вать любая к
иш
ечная пал
очка, если по каким
либо причинам резко снижается резистентность
организма новорожденного. Иенсен
первый
приготовил вначале моно валентную сыворотку
а затем поливалентную гипериммунную колисыворотку
и с усп
ехом ее применил для профилактики Влбелого поносаВ».
Мнение Иенсена
разделяли и русские исследователи [П. Алтухов, 1904; М. К. Апалев, 1908].
Иенсен указывал, что гибель новорожденных телят, может быть как в результате септической формы колибациллеза,
так и в результате тяжелого гастроэ
нтерита с явлениями интоксикации, без проникновения возбудителя в кровяное русло. Автор не обнаружил различия в культурально-биохимических
свой
ствах
у штаммов, выделенных от поносящих телят, и штаммов, выдела
нных от здоровых
животных того же возраста.
Количественные и качеств
енные соотношение
разных серогрупп
Е. coli
в содержимом кишечни
ка
мало чем различаются у бол
ьных и здоровых телят [W. J. Sojka, 1971].
В настоящее время для дифференциации энтеропатогенных
штаммов и непатогенных используют классический тест на изолированных петлях кишечника кролика, поросенка, теленка [E. Salajka, 1980]
.
В последнее время опубликован
о значительное количество работ, в которых подробно дается характеристика купьтурально-морфологических
и биохи
мических свойств Е. coli
выделенных
от новорожденных телят, как больных, так и здоровых [C. O. Jensen, 1897; О. С. Андреева, 1966; Е. П. Чиркова, 1968; А. Ф. Пилуй, В. А. Ленькова, В. В. Медведьев, 1974; L. L. Myers, P. A. Guinee, 1976; Я. Е. Коляков, 1978; Л. К. Волынец, 1978; J. Hutchinson, 1979; М. А. Сидоров, 1980; S. Tzipori, 1981; H. Brade, C. Galanos, 1983; И. И. Тарасов, 1984; Б. М. Анохин, 1985; А. В. Драгомир., Е. А. Драгомир., А. Ф. Карышева, Ф. В. Спатарь,1985; И. И. Фельдман, 1985; В. Тилга, Н. Кампус, 1986; У. Риихикоски, 1986; H. W. Ewing, 1986; М. А. Сидоров, 1987; Н. А. Соколова, О. А. Полякова, Н. И. Евглевская, 1987; К. С. Ливанов, 1988; I. Blanco, E. A. Gonzalez, S. Garcia, 1988; Н. Н. Жосан, 1989; А. А. Гутковский, 1989; B. H. Janke, D. H. Francis, J. E. Collins, 1990; В. Г. Зароза, 1991; Ю. С. Кабанков, С. Ф. Армашу, 1991; G. Galiero, M. Palladino, O. Lai, C. G. Goffredi, 1995; А. В. Куликовский, А. Н. Панин, В. В. Соснина, 1997].
Согласно последним
международным класс
ификациям кишечных бактерий (
9-о
е издание определителя бактерий Берги) род Escherichia
представлен одним видом Escherich
ia coli, который в свою очередь делится на серо-ферментативные типы.
Е. coli
представляет собой бактерию
или кокобактерию
разме
ром 1-
4 мк
м/0,4-0,6 мкм.
Под влиянием внешних факторов эшерихии
трансформируются в нитевидные формы длиной до 8-10 мкм. Спор
не образуют. Перитрихи,
но некоторые штаммы не имеют жгутиков (ат
рихи)
. П
од воздействием антибиотиков и других факторов образуются гранулярные формы (L-форма),
представленные сферическими эл
ементами различной величины (5-20 мкм).
Большинство серотипов,
изолированных
от здоровых животных не образ
ую
т капсулу. Изолированные серотипы
от больных животных могут быть как капсулообразующими
(серотипы
08, 09 и 0101),
так и не образующими капсулу.
Красятся всеми анилиновыми красками. Грам-негативные.
Е. coli обладают ресничками
(пи
ли),
которые предс
тавляю
т рецепторы, посредством которых происходит абсорбция на бак
териальной клетке РНК-содержащих
фа
гов, а также осуществляется проникновение РНК фага в микробную клетку. В процессе конъ
югации через реснички (пили), выполняющие роль
коньюгационного
мостика (канала) происходит передача ДНК от клетки донора к клетке рецип
иенту. Фимбрии
(реснички, пили) обла
дают
адгезивными
свой
ствами с помощью
которых эшерихии
прикрепляются на эпителиальных
клетках пищеварительного тракта.
Способность Е. coli
образовывать фимбриальные
адгезины
определяют
в капель
ной РА
с моноспецифическими антиадгезивными
сыворотками
К99, F41, Аtt25, 98
7Р, К
88
ав, К88ас, К88аd [О.А. Полякова, Н. И. Евглевская, Н. А. Соколова, 1986; Ю. А. Маллахов, О. А. Тугаринов, М. К. Пирожков, Т. И. Исхакова, 1993].
Е. coli ‑ аэроб или факул
ьтативный анаэроб. Оптимал
ьная температура роста 37,5В° С
, рост и размножение бактерий может происходить в п
ределах 15-45В° С, оптимум рН
7,0, но культивировать возможно и при зн
ачительных изменениях рН среды.
Культивируют, как на обычных (МПБ,
МПА),
так и на дифференцнально-днагностических средах (Эндо,
Левина). В МПБ рост эшерихий
характеризуется равномерным пому
тнением среды без осадка ил
и с образованием незначительного осадка легко разбивающегося при встряхивании. В старых культура
х образу
ется иногда пристеночное
кол
ьцо и очень редко пленка. Форму ВлRВ» бактерий
продуцируют кул
ьтуры образующие, осадок, а МПБ
остается почти прозрачным.
На МПА
форма ВлSВ» бактерий образуют округлы
е колонии, с
легка выпуклые, непрозрачные с ровными краями. Форма ВлRВ» представлена сухими колониями, сплю
щенными, плотно прил
егающими к среде с неровными краям
и. Размер кол
оний варьирует в предел
ах 2-10 мм.
На с
реде Эндо
кишечная палочка растет в виде малиново-красны
х колоний с металлическим блеском или без него, а на среде Левина (агар с эозином и метиленовой
синькой)
в виде темно-фиолетовых или черных колоний.
Кишечная палочка не требовательна
к питательной среде и способна размножаться даже в изотоническом
растворе хлорида натрия [Я. Е. Коляков, С. С. Гительсон, Л. С. Каврук, 1990].
1.1.3. Биох
им
иче
ские
свойства. Одним из ведущих дифференциальных
признаков кишечн
ой
палочки, отличающих ее от бактерий других
родов семейства Enterobacterace
a является сбраживание
лактозы
с образ
ованием кислота
и газа [И. В. Голубева, 1985].
Кишечная палочка способна ферментировать многие сах
ара и много
атомны
е спирты, глюкозу,
маннит,
дульцит,
сахарозу,
арабинозу
и др.
,
но, как правило, не изменяет адонита
и инозита. При сбраживании
углев
одов
образуется
пируват,
превращающийс
я в молочную, укс
усную и муравьиную
кислоты.
Гл
юкоза, лактоза, маннит сбраживаются
с образова
нием
кислоты
и газа. Саха
Вместе с этим смотрят:
Principala cauza a handicapului
РЖсторiя виникнення та розвитку масажу