<< Пред.           стр. 90 (из 116)           След. >>

Список литературы по разделу

  | | Номера сред |
  | Ингредиенты |------------------------------------------------|
  | | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 |
  |-----------------------------------------------------------------|
  | Содержание каждого ингредиента |
  |-----------------------------------------------------------------|
  |Мясо - пептонный| | | | | | |
  |бульон 1:2 | | | | | | |
  |Ферментативный | 5 г | 5 г | 5 г | | | 5 г |
  |гидролизат био-| | | | | | |
  |массы микроорга-| | | | | | |
  |низмов без обо-| | | | | | |
  |лочек | | | | | | |
  |Агар - агар | 20 г | 15 г | 15 г |18-20 г| 18 г | 15-20 г|
  |Глюкоза | | | | | 5 г | 5 г |
  |Натрия фосфат | | | | 5 г | 15 г | |
  |двузамещенный | | | | | | |
  |Калия фосфат | | | 25 г | | | |
  |однозамещенный | | | | | | |
  |Натрия хлорид | | | | 20 г | | 30 г |
  |Калия хлорид | 20 г | | | 20 г | | |
  |Мочевина | | | | | 2 г | |
  |Аммония цитрат | | | | 5 г | | |
  |двузамещенный | | | | | | |
  |Аммония хлорид | | | | | 2г | |
  |Вода |1000 мл|1000 мл|1000 мл|1000 мл|1000 мл|1000 мл |
  |дистиллированная| | | | | | |
  |рН после |7,0-7,2|7,8-8,0|7,0-7,2|5,8-6,0|7,8-8,0|6,8-7,0 |
  |стерилизации | | | | | | |
  -------------------------------------------------------------------
 
  Мясо - пептонный бульон (среда N 1) готовят на водопроводной
  воде обычным способом, изложенным в руководствах по микробиологии.
 
  Примечания: 1. Количество агар - агара в средах указано для
  цилиндро - чашечной модификации. В случае применения лунок
  количество агар - агара увеличивают до 20-25 г на 1000 мл среды.
  2. Допускается уменьшение или увеличение содержания агар -
  агара в средах в зависимости от его качества.
  3. Допускается использование взамен сред с ферментативным
  гидролизатом биомассы микроорганизмов (без оболочек) сред с
  другими источниками аминного азота:
  а) сухих сред на основе сухого рыбного бульона. При
  использовании данной среды в отдельных случаях необходимо
  изменение посевной дозы тест - микроба и увеличение концентрации
  растворов стандартных и испытуемых образцов;
  б) сред на основе панкреатического гидролизата мяса (по
  Хоттингеру) глубокого расщепления. Среды N 6, 7, 8, 10 должны
  содержать 130-140 мг% аминного азота, а среды N 4, 5, 9, 13 - 30 -
  35 мг% аминного азота. Для приготовления сред с гидролизатом мяса
  применяют дистиллированную воду. Панкреатический гидролизат мяса и
  среды на его основе готовят обычным способом, изложенным в
  руководствах по микробиологии. Условия проведения анализа на
  средах с панкреатическим гидролизатом не отличаются от условий
  проведения анализа на средах с ферментативным гидролизатом
  биомассы микроорганизмов без оболочек.
 
  При контроле активности антибиотиков применяются буферные
  растворы, состав которых приводится в табл. 20.
 
  Таблица 20
 
  Состав буферных растворов
 
  --------------------------------------------------------------------
  | Ингредиенты буферов | Содержание ингредиентов |
  | |---------------------------------------|
  | | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
  |--------------------------+-------+-------+-------+-------+-------|
  |Калия фосфат однозамещен- | | | | | |
  |ный, г | 3,63 | - | 7,72 | 0,68 | 32 |
  |Калия фосфат двузамещен- | | | | | |
  |ный, г | - | - | | | 8 |
  |Натрия фосфат двузамещен- | | | | | |
  |ный, г | 7,13 | - | 1,78 |10,99 | - |
  |Натрия цитрат трехзамещен-| | | | | |
  |ный, г | - | 20,6 | - | - | |
  |Кислота хлористоводородная| | | | | |
  |концентрированная, г | - | 1,81 | - | - | |
  |Вода дистиллированная, до| | | | | |
  |1000 мл | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
  |рН буфера |6,8-7,0|5,8-6,0|6,0-6,2|7,8-8,0|6,0-6,2|
  --------------------------------------------------------------------
 
  Приложение 1
 
  Вычисление ошибки логарифма активности испытуемого S
  lg C
  U
  проводится согласно разделу I.6 фармакопейной статьи
  "Статистическая обработка результатов химического эксперимента и
  биологических испытаний".
  2
  Сначала вычисляют величину дисперсии S , характеризующую
  0
  разброс значений d1, d2, d3, d4, d5 относительно прямой
  D = a + b x lg C:
 
  2 5 2
  S = [ SUM (di - (а + b x lg Ci)) ] / 3
  0 i=1
 
  Тогда:
  --------------------------------------------------
  / 2 _ _2
  / S 5 (d - d )
  / 0 1 U S
  S = / ----- (0,2 + -- + ------------------------------),
  lg C / 2 n 2 5 2 5 2
  U \/ b b (5 SUM lg Ci - SUM lg Ci)
  i=1 i=1
 
  где n - число параллельных испытаний величины С , приведенных в
  U
  опыте с одной стандартной кривой; d - среднее значение диаметра
  U
  зон задержки роста для испытуемого, полученное по n испытаниям; d
  S
  - среднее значение диаметра зон задержки роста для контрольной
  концентрации, полученное по тем же n испытаниям.
  Число степеней свободы величины S равно 3.
  lg C
  U
  Пример. Вычислим S c использованием данных примера,
  lg C
  U
  приведенного в основном тексте статьи для иллюстрации вычисления
  параметров стандартной кривой.
  2
  Расчеты S удобно проводить с помощью следующей таблицы.
  0
 
  ------------------------------------------------------------------
  | Ci | lg Ci | di | a + b x | 2| 2 |
  | | | | x lg Ci |[di - (a + b x lg Ci)] |lg Ci |
  |--------+--------+-----+---------+-----------------------+------|
  | 3,2 | 0,5051 |17,64| 17,63 | 0,0001 |0,2551|
  | 4,00 | 0,6021 |18,15| 18,26 | 0,0121 |0,3625|
  | 5,00 | 0,6990 |19,03| 18,90 | 0,0169 |0,4886|
  | 6,25 | 0,7959 |19,58| 19,53 | 0,0025 |0,6334|
  | 7,8 | 0,8921 |20,09| 20,16 | 0,0049 |0,7958|
  |--------+--------+-----+---------+-----------------------+------|
  |Суммы по| | | | | |
  |столбцам| 3,4942 | | | 0,0365 |2,5354|
  ------------------------------------------------------------------
 
  При вычислении значений а + b x lg Ci необходимо брать
  достаточное число знаков для а и Ь.
  Пусть число испытаний образца в опыте n = 1, d = 18,61 и d =
  S U
  18,44
  _
  Тогда d = d = 18,61; d = d = 18,44. Найдем S :
  S S U U lg C
  U
  2
  S = 0,0365 / 3 = 0,01217;
  0
 
  ---------------------------------------------------
  / 2
  /0,01217 5 x (18,44 - 18,61)
  S = / ------- x (0,2 + 1+ x ------------------------------ =
  lg C / 2 2 2
  U \/ 6,532 6,532 x (5 х 2,5355 - 3,4943)
 
  = 0,0185.
 
  Приложение 2
 
  Объединение результатов n опытов, выполненных с одним и тем же
  разведением образца гамма , проводится усреднением значений
  U
  логарифмов активностей испытуемого с учетом ошибок их определения
  в каждом опыте по формуле:
 
  _ N N
  lg C = (SUM gj x lg C ) / SUM gj,
  U j=1 Uj j=1
 
  2
  где gj = 1 / S x lg C .
  Uj _
  Ошибка определения величины lg С при этом будет равна:
  U
 
  ------
  / N
  S _ = 1 / / SUM gj .
  lg C \/ j=1
  U
 
  Доверительный интервал для величины логарифма истинной
  активности записывается с учетом значения критерия Стьюдента,
  взятого из таблиц для доверительной вероятности Р = 0,95 и числа
  N
  степеней свободы f = SUM fj, где fj - число степеней свободы
  j=1
 
  величины S :
  lg С
  Uj
  _
  lg C +/- t(P, f) S _
  U lg C .
  U
 
  Пример. Проведены два опыта по определению активности
  препарата. Разведение испытуемого гамма = 200. В первом опыте два
  U
  испытания дали следующие результаты:
 
  lg С1 = 0,6221; S = 0,0170 при f1 = 3.
  lg С1
 
  Во втором опыте по четырем испытаниям имели:
 
  lg C2 = 0,6305; S = 0,0099 при f2 = 3.
  lg C2
  Для объединения результатов проводят следующие вычисления:
 
  2
  g1 = 1 / 0,017 = 3460;
  2
  g2 = 1 - 0,0099 = 10203;
 
  g1 + g2 = 13663;
  _
  lg С = (3460 х 0,6221 + 10203 х 0,6305) / 13663 = 0,6284;
  U
  ------
  S _ = 1 / \/ 13663 = 0,0086.
  lg С
  U
 
  Границы доверительного интервала для логарифма истинной
  активности образца получают с использованием величины
  t(0,95; 6) = 2,45:
  0,6284 +/- 2,45 х 0,0086 = 0,6284 +/- 0,0211.
  Таким образом, нижняя граница 0,6073, верхняя граница 0,6495.
  Потенцируя, найдем среднее значение и границы доверительного
  интервала для истинной активности основного рабочего раствора
  испытуемого: 4,250; 4,049; 4,462. Учет степени разведения при
  получении основного рабочего раствора позволяет получить среднее
  значение, а также нижнюю и верхнюю границу несимметричного
  доверительного интервала для истинной активности испытуемого: 850;
  810; 892.
  Точность определения должна быть такова, чтобы доверительные
  границы при Р = 95% отклонялись от среднего значения не более чем
  на +/- 5%. В данном случае, используя верхнюю границу
  доверительного интервала, имеем:
 
  892 - 850 42
  --------- х 100% = ----- х 100% = 4,94% < 5%.
  850 850
 
  ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ
 
  1. CORMUS LEDI PALUSTRIS
 
  ПОБЕГИ БАГУЛЬНИКА БОЛОТНОГО
 
  Собранные в августе - сентябре в фазу созревания плодов и
  высушенные олиственные побеги текущего года дикорастущего
  вечнозеленого кустарника багульника болотного - Ledum palustre L.,
  сем. вересковых - Ericaceae.
  Внешние признаки. Цельное сырье. Смесь олиственных побегов,
  листьев и небольшого количества плодов. Листья очередные, на
  коротких черешках, кожистые, линейно - продолговатые или
  продолговато - эллиптические, цельнокрайние, длиной 15-45 мм,
  шириной 1-5 мм, с завернутыми вниз краями; с верхней стороны темно
  - зеленые, блестящие; с нижней стороны покрыты густым оранжево -
  коричневым войлочным опушением. Стебли цилиндрические с оранжево -
  коричневым войлочным опушением. Плод - многосемянная продолговатая
  коробочка 3-8 мм длиной, железисто - опушенная, раскрывающаяся при
  созревании снизу вверх пятью створками. Запах резкий,
  специфический. Вкус не определяется.
  Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев и плодов,
  проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 5 мм.
  Цвет зеленый, темно - зеленый, оранжево - коричневый,
  серовато - коричневый. Запах резкий, специфический. Вкус не
  определяется.
 
  Примечание. Сырье, предназначенное для получения ледина, не
  измельчают.
 
  Микроскопия. При рассмотрении листа с поверхности видны клетки
  эпидермиса с обеих сторон листа - мелкие с тонкими или
  четковидно - утолщенными извилистыми стенками, над жилками - с
  прямыми. Устьица только на нижней стороне, крупные, приподнятые, с
  4-8 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Верхняя сторона
  листа покрыта толстой кутикулой; волоски встречаются редко. Нижняя
  сторона густо опушена волосками трех типов: длинные,
  многоклеточные, лентовидные, извилистые и перекрученные волоски,
  состоящие из двух рядов клеток, с красно - коричневым содержимым;
  мелкие одноклеточные волоски с толстой оболочкой, покрытой
  бородавчатой кутикулой; головчатые волоски на одно- или
  многоклеточной ножке с многоклеточной круглой головкой, содержащей
  маслянистые капли. Эфиромасличные железки встречаются на обеих
  сторонах листа, но больше на нижней; они состоят из крупной

<< Пред.           стр. 90 (из 116)           След. >>

Список литературы по разделу